柱前衍生化hplc测定大鼠血浆和脑组织中与抑郁症相关的12种氨基酸.pdfVIP

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１２，４３（４）：３４５－３４９ ３４５ 柱前衍生化 ＨＰＬＣ测定大鼠血浆和脑组织中 与抑郁症相关的１２种氨基酸 １ １，２ 王　? ，冯　芳 １ ２ （中国药科大学 药物分析学教研室 ；药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京２１０００９） 摘　要　建立一种使用９，１０蒽醌２磺酰氯作为衍生化试剂的柱前衍生化ＨＰＬＣ法，用于测定大鼠血浆和脑组织中 与抑郁症相关的１２种氨基酸。血浆和脑组织样本经乙腈沉淀蛋白后，加入Ｋｏｌｔｈｏｆｆ缓冲液（ｐＨ８８）和衍生化试剂，室温 下反应５ｍｉｎ后进行色谱分析。采用ＬｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒＣ柱（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５ ｍ）；流动相为乙腈２０ｍｍｏｌ／Ｌ醋酸铵缓冲液 １８ μ （ｐＨ７５），梯度洗脱；流速：１０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：３５℃；检测波长：２５４ｎｍ。１２种氨基酸在各自的浓度范围内线性良好。本方 法灵敏准确、专属性高，可用于大鼠血浆和脑组织中与抑郁症相关的氨基酸的测定。 关键词　柱前衍生化；ＨＰＬＣ；９，１０蒽醌２磺酰氯；氨基酸；抑郁症 中图分类号　Ｒ９１７　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１２）０４－０３４５－０５ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ１２ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｒｅｌａｔｅｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎｒａｔｐｌａｓｍａａｎｄｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｂｙＨＰＬＣｗｉｔｈｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ １ １牞２ ＷＡＮＧＺｈｅ牞ＦＥＮＧＦａｎｇ １ ２ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ牷ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｒｕｇＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｖｉｇｉｌａｎｃｅ牗ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ牘牞 ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＡｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆ１２ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｒｅｌａｔｅｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎｒａｔ ｐｌａｓｍａａｎｄｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｕｓｉｎｇ９牞１０ａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅ２ｓｕｌｆｏｎｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅａｓｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄ． Ｒａｔｐｌａｓｍａａｎｄｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅｄｅｐｒｏｔｅｉｎａｔｅｄｂｙａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｎｄｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄｆｏｒｏｎｌｙ５ｍｉｎａｔｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｂｙａｄｄｉｔｉｏｎｏｆＫｏｌｔｈｏｆｆｂｕｆｆｅｒ牗ｐＨ８８牘ａｎｄｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔＴｈｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｏｎａＣ ｃｏｌｕｍｎ １８ ａｔ３５°Ｃａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄａｔ２５４ｎｍＴｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｎｄ２０ｍｍｏｌ／Ｌａｍｍｏｎｉｕｍａｃｅｔａｔｅｂｕｆｆｅｒ 牗ｐＨ７５牘ｗｉｔｈａｇｒａｄｉｅｎｔｐｒｏｇｒａｍａｔ１０ｍＬ／ｍｉｎＧｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｗａｓａｃｈｉｅｖｅｄｏｖｅｒｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｆｏｒ ｅａｃｈａｍｉｎｏａｃｉｄＴｈｅｍｅｔｈｏｄｈａｓｇｏｏｄｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ牞ａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ牞ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｒａｔｐｌａｓｍａａｎｄｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ Ｋｅ