DNA重组-中国农业CEO网.PPT

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 Copia 转座子 是果蝇的一种反转录转座子(retrotransposon)。 反转录转座子：是指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。 由于该转座子编码高丰度mRNA分子，故称之为Copia （丰富之意）转座子。 mRNA丰度：是指一个细胞平均拥有的某种特定mRNA分 子的拷贝数。丰度也就是常说的丰富程度。 高丰度mRNA mRNA的拷贝数在1000-10000之间，在细 胞中高丰度mRNA有100种左右。 低丰度mRNA mRNA的拷贝数在1-10之间，在细胞中有 10000种左右。 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 Copia转座子全长5000bp左右，两端各有-个相同的276bp的 正向重复序列(DR)，每个正向重复序列本身的两端还各有一个反向重复序列(IR)。当Copia转座子转座插入染色体时，在插入位点上产生5bp的正向重复序列。 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 Copia 转座子的转录产物是po1y(A)+mRNA 完整全长的转录本 产物有两种形式 部分长度，即截短的转录本 二者都有相同的5‘末端。 翻译产生的蛋白质可能参与RNA的剪接和多肽的切割。 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 研究发现，果蝇中几乎所有的杂种不育都是由P 转座子插入基因组W位点而引起的。 - P因子的转座也属于非复制型。 - P 转座子两端具有31个碱基倒置重复序列， P 转座子转 座导致靶DNA复制产生8碱基正向重复序列。 - P 转座子含有4个外显子（编号为0，1，2，3）和 3个内含子（1，2，3）， 可转录为2.5kb和3.0kb两个长度不同的RNA前体。P61，图2-39 P 转座子 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 果蝇的体细胞中：在mRNA前体剪接时，只有内含子 1和2 被切除，形成含有4个外显子和1个内含子的mRNA，并被翻译成一个相对分子质量为6.6?104的转座阻遏物，而不能编码转座酶。 体细胞中的P转座子是缺失型P转座子，它的转座依赖于全长P转座子。 果蝇的卵细胞中：在mRNA前体剪接时，3个内含子 全部 被切除，形成含有4个外显子的mRNA，并被翻译成一个相对分子质量为8.7?104的转座酶。 卵细胞中的P转座子是全长P转座子，导致P转座子转座和配子体败育。 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 果蝇P因子的结构 第二章 染色体和DNA DNA转座重组 研究结果表明：P 转座子中第三个内含子的切除是发生转座 所必需的。 证据一： 突变内含子3的末端序列，P转座子转座活性丧失。 证据二：从核基因组中切除与内含子相对应的DNA序列， P 转座子能够同时在体细胞和卵细胞中进行转座。 第二章 染色体和DNA DNA转座重组