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特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选
摘 要:采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg?L-1+2,4-D 1.0 mg?L-1+6-BA 0.5 mg?L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg?L-1+GA3 1.0 mg?L-1+6-BA 1.0 mg?L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。
关键词:特色马铃薯;愈伤组织;诱导;分化
中图分类号:S532 文献标识码:A DOI 编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2017.02.004
Abstract: L9(34)orthogonal design was adopted to select the optimal plant hormone combination for regeneration of ‘Hongbaoshi’ potato stem. Three plant hormones(callus induction with NAA、2,4-D、6-BA and bud differentiation with NAA、GA3、6-BA) were applied at three different levels to study their influences on the growth and differentiation of potato stem. The results indicated that the optimal medium for callus induction from stem was the 6 number medium (MS+NAA0.5 mg?L-1+2.4-D1.0 mg?L-1+6-BA0.5 mg?L-1), with 100% induction percentage. The optimal medium for inducing bud differentiation from stem callus were the number 8 medium (MS+NAA0.5 mg?L-1+GA31.0 mg?L-1+6-BA1.0 mg?L-1), with 80.3% induction percentage of adventitious buds and strong seedling.
Key words: potato;callus;induction;differentiation
通过遗传转化实现目的基因的转移,从而改良经济性状,使马铃薯遗传基础日益丰富,产量和品质不断得到提高[1-4]。而无论是基因转化,还是转基因植株数量的增加,都依赖于良好的植物受体系统的建立,受体系统的建立则主要依赖于植物组织培养的再生环节,即建立高效的马铃薯离体再生体系。许多研究表明,再生系统易受基因型、外植体种类、植物激素种类及浓度、培养条件和操作水平等诸多因素的影响[5-11]。因此,对特定品种、特定材料进行再生系统筛选,以确定有针对性的最佳培养基配方非常必要。
红宝石是一个皮肉皆是红色的彩色马铃薯特色品种,因其外形美观、品质好(适合烤、蒸、煮、炸、炒,且色泽不变)、营养价值高(比普通马铃薯丰富)、商品附加值高、适用性强而备受青睐,具广泛的应用前景。本试验在前人研究的基础上,对特色马铃薯品种红宝石的茎段离体培养和再生进行初报,以期为其基因转化研究奠定基础。
1 材料和方法
1.1 试验材料
以特色马铃薯品种红宝石脱毒试管苗茎段为材料,由贵州省马铃薯研究所组培室茎尖脱毒培养构建而成。
1.2 方 法
1.2.1 愈??组织诱导及分化培养基配制 以MS为基本培养基,附加30 g?L-1蔗糖和6 g?L-1琼脂,添加不同激素配制成愈伤组织诱导培养基,具体设计采用3因素3水平L9(34)的正交试验(表1),NAA质量浓度为0.2,0.5,1.0 mg?L-1;2,4-D质量浓度为0,0.5,1 mg?L-1;6-BA质量浓度为0.5,1,2 mg?L-1。
以MS为基本培养基,附加30 g?L-1蔗糖和6 g?L-1琼脂,添加不同激素配制成分化培养基,具体设计采用3因素3水平L9(34)的正交试验(表1),NAA质量浓度为0.05,0.1,0.5 mg?L-1;GA3质量
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