AFLP分子标记技术和其在蔬菜遗传育种中的应用进展.pdf

江苏农业科学2020年第5期 侯雷平，梅默，崔艳玲，等．APLP分子标记技术及其在蔬菜遗传育种中的应用进展[J]．江苏农业科学，2010(5)：22—25． 分子标记技术及其在蔬菜遗传育种中的应用进展 侯雷平1，梅赕1．一．崔艳玲2，陈海丽2，孟淑春2 (1．山西农业大学园艺学院，山西太谷030801；2．北京市农林科学院蔬菜研究中心，北京100097) 摘要：扩增片段长度多态性(AFLP)技术是检测DNA多态性的一种分子标记技术。本文介绍了AFLP分子标记 技术的基本原理、技术流程及特点，及其在蔬菜遗传与育种中的应用进展，并对其前景进行了展望。 关键词：AFLP；分子标记技术；蔬菜；遗传与育种；应用 中图分类号：$630．24文献标志码：A 文章编号：1002—1302(20lO)05一0022—04 分子标记是在形态标记、细胞标记和生化标记之后发展 酶切。所有双酶切反应包括2种酶，一种为低频剪切酶(如 EcoR 起来的新的较为理想的一种遗传标记形式，是以生物大分子 1)，识别位点为6碱基，另一种为高频剪切酶(如Mse 物质，尤其是生物体的遗传物质——核酸的多态性为基础的 I)。识别位点为4碱基，把基因组DNA切成大小不同的限制 遗传标记，近年来分子生物技术为蔬菜遗传育种研究带来了 性片段，然后用限制性内切酶对应的双链接头与酶切产物连 巨大变化。1992年Zsbeau等¨o创立的A凡P(amplified胁g-接作为扩增反应的模板。在用含有1个选择性碱基的引物对 ment lengthpolymorphism)技术是国际上必威体育精装版的DNA指纹技酶切连接后模板进行预扩增，最后用含有3个选择性碱基的 术。该技术是在PCR技术和RFLP标记技术基础上发明的引物对预扩产物进行选择性扩增。预扩产物和选择性扩增产 DNA指纹技术。该方法结合了RFLP(restriction物的大小和数量取决于3点：(1)酶切时DNA的纯度及浓 frabgment 度；(2)酶切时间是否适当．太短则酶切反应不完全，太长则 lengthpolymorphism)技术和RAPD(randomamplifiedpolymor- phicDNA)技术的特点，可获得多态性图谱拉。，既具有PCR的导致酶活力下降，导致酶切片段的碱基互补配对再次连在一 高效性、安全性和方便性的特点，又具有RFLP可靠性好、重起；(3)预扩和选扩产物与含有选择性碱基的引物是否匹配， 复性高的优点。不需要了解基因组信息，且只需少量纯化的基 如果完全匹配则扩增效果好，有时候和引物3’端的最后1个 因组DNA即可对整个基因组DNA酶切片段进行选择性扩碱基能配对(其他碱基有一些不配对)的片段也能进行扩增， 增，适合于所有基因组的检测。本文就AFIT的基本原理、操但扩增效果不好。所以只有和含有选择性引物很好配对的片 作流程、特点及其在蔬菜遗传与育种中的应用和前景进行 段，才能被大量地扩增出来。 概述。 EcoRI adapter： (50 GTAGACTGCGTACC pmol／斗L)：5’一CTC 1 AFLP的简介、技术流程及其特点 CATCTGACGCATGGrTAA一5’ 1．1 Mse AnP的简介 I adapter： restriction GATGAGTCCTGAG 扩增片段长度多态性(AFLP。amplifiedfragment (50