植物色素的提取.doc

植物色素的提取、分离和测定 指导老师：田燕 专业：制药11—1 姓名：郭超、朱日娜 学号：201104011078 201104011093 1、摘要 波层色谱法可以很好地分离色素。因为在用抽滤法提取色素的过程中，由于抽滤时不好控制，非极性溶剂难免会被抽去。且在几次转移中损失较多，程序繁杂．用浸泡法操作简便易行，损失少，产率高。故在实验中采取了浸泡法提取色素，使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。薄层层析时使用了石油醚-乙酸乙酯=8:2、6:4、5:5、4:6，对比展开效果。在柱层析时，用洗脱剂分离得到不同物质，结果证明石油醚-乙酸乙酯=8:2做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定，检验实验成果。 薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。 2、关键词：菠菜色素；提取；分离;胡萝卜素；紫外光谱测定 3、正文 （1）引言 绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。 叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg))，差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂，也是食用的绿色色素，可用于糕点、饮料水等中，添加于胶姆糖中还可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。 胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体α—，β—,和γ—胡萝卜素，其中β—异构体含量最多，也最重要。生长期较长的绿色植物中，异构体中β—的含量多达90％。β—具有维生素A的生理活性，其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。生物体内，β—体受酶催化氧化即形成维生素A。目前，β—体可作为维生素A使用，也可作为食品工业的色素，β一胡萝卜素还有防癌功能。 叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。 由此可见，叶绿素等天然色素有广泛的用途，对于色素的提取与分离就显得很重要了．本实验就提取和分离做了相关的研究。 (2)实验部分 A、仪器和药品 玻璃片（10cm×3cm）,展缸，毛细管，分液漏斗，锥形瓶，底烧瓶，玻璃棒， 色谱柱，分液漏斗，烧杯，量筒，减压抽滤机，UV-240紫外分光光度计 新鲜菠菜，硅胶G，羧甲基纤维素钠，乙醇，石油醚，乙酸乙酯，无水硫酸钠圆 B、实验步骤 1.薄层色谱板的制备 （1）制备薄层载片 如是新的玻璃板（厚约2.5mm），切割成150*30*2.5mm或100*30*2.5mm的载玻片，水洗，干燥。如果重新使用的载玻片，要用洗衣粉和水系，用水淋洗，用50%甲醇溶液淋洗，让片完全干燥。取用时应让手指接触片的边缘，因为指印沾污片的表面上将使吸附剂难于铺在片上。 （2）制备浆料 容器：带螺旋盖的广口瓶。 操作：制成浆料的要求要均匀，不带团块，粘稠适当。为此，应将吸附剂慢慢地加至溶剂中，边加边搅拌。如果将溶剂加至吸附剂中常常会出现团快状，加料毕，剧烈搅拌，保证充分混合。量取30ml 0.5%的羧甲基纤维素钠，和水混合后用加热装置加热至70℃，溶解后抽滤，吸取10ml滤液加入4g硅胶G，充分混合后研磨。 铺制薄层板操作是：在带有螺旋盖的瓶子中盛满浆料（1g硅胶G需要3ml氯仿或需要3ml氯仿-乙醇混合物（体积比为2：1），在不断搅拌下慢慢蒋硅胶加入于氯仿中，盖紧，用力振摇。使之成均匀糊状），选取大小一致的载玻片紧贴在一起，两块同时浸涂。因为浆料在放置时会沉积，故浸涂之前均应将其剧烈振摇。用拇指和食指捏住玻璃片上端缓慢地均匀地将片浸入浆料中并取出多余的浆料任其自动滴下，直至大部分溶剂已挥发后将两块分开，放在水平板上晾干。 若浆料太稠，涂层可能太厚，甚至不均匀，若浆料稀薄，则可能是涂层薄。若出现上述两种情况，须调整粘稠度。要掌握铺层技术，反复实践是必要