免疫标准操作程序SOP.doc

标准操作程序 项 目 IgM检测的标准操作程序 方 法 ELISA方法 编写人 冯岚 日期 2005/01/01 审核人 曹进平 日期 2005/01/01 批准人 陈健康 日期 2005/01/01 文件分发部门和/或个人 本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次 CHDEYY-JYK-MY-001 文件版本号 第1版 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 实验室名称 项目 编号 制定日期 芜湖市第二人民医院检验科免疫室 甲型肝炎病毒IgM检测的标准操作程序 WHDRYY-JYK-MY-001 共2页 第1页 2005-01-01 [目的] 保证检测结果准确可靠。 [该SOP变动程序] 本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经专业主管、科主任 批准签字。 [标本的采取和保存] 采静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。 [测定原理] 采用兔抗-人IgMu链包被反应被，加入待测标本，同时加入HAVAg，抗HAV-HRP，如待测标本中含有抗-HAV-IgM时，就能与包被兔抗-人IgMu链结合，并且与HAVAg,抗-HAV-HRP结合成复合物，加TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。 [操作步骤] 将待测标本用生理盐水作（1：1000）稀释，每孔加入稀释标本100ul，设阴、阳性对照各2空，每孔加入阴性对照（或阳性对照）100ul（或2滴），并设空白对照一孔，封板，置37度孵育20分钟。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。 每孔加入HAVAg30ul（或一滴），酶结合物50ul（或一滴），（空白对照孔不加），充分混匀，封板，置37度孵育20分钟。 洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。 每孔加显色剂A液、B液各50ul（或一滴），充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。 每孔加入终止液50ul（或一滴），混匀。 用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。 [结果判断] 样品OD值除以阴性对照平均OD值大于或等于2.1判断为阳性，否则为阴性 阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算 [临床意义] 血清中HAV—IgM在亚临床期即已出现，其滴度在感染后3个月维持在1000以上，早被公认为早期诊断甲型肝炎的依据。 [注意事项] 试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。 从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。 洗板时所用的洗水纸请勿反复。 不同批号试剂请勿通用。 结果判断须在10分钟内完成。 实验室名称 项目 编号 制定日期 芜湖市第二人民医院检验科免疫室 甲型肝炎病毒IgM检测的标准操作程序 WHDEYY-JYK-MY-001 共2页 第2页 2005-01-01 封片不能重复使用。 用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。 标准操作程序 项 目 方 法 ELISA方法 编写人 冯岚 日期 2005/01/01 审核人 曹进平 日期 2005/01/01 批准人 陈健康 日期 2005/01/01 文件分发部门和/或个人 本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次 WHDEYY-JYK-MY-002 文件版本号 第1版 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 实验室名称 项目 编号 制定日期 芜湖市第二人民医院检验科免疫室 乙肝表面抗原检测的标准操作程序 WHDEYY-JYK-MY-002 共2页 第1页 2005-01-01 [目的] 保证检测结果准确可靠。 [该SOP变动程序] 本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 [标本的采取和保存] 随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。 [测定原理] 双抗体夹心法测HBsAg：抗S包被反应板，加入待测血清后，再加入酶标抗S，加底物显色为阳性，证明样本中含被测物，含量与显色程度成正比。 [操作步骤] 实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。 加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照