大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究.ppt

大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 导 师: 徐莱(教授) 答辩人: 谢福平 专 业: 应用化学(涂料方向) 论文框架 实验内容 结语 * 研究背景 研究方法 研究内容 结论与展望 1 2 3 4 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 1 2 1 2 1 3 2 1 3 2 1 4 3 2 1 4 3 2 1 研究背景 研究方法 研究内容 结论与展望 4 3 2 1 1 3 4 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 研究背景 1 背景 大豆异黄酮是大豆生产过程中形成的一类次生代谢物。早期的研究认为，大豆异黄酮的存在使豆制品具有苦涩味，被认为是抗营养因子。直到上世纪九十年代初国外流行病学研究发现了大豆异黄酮的功效后，大豆异黄酮的功能开始引起人们关注。 意义 随着人民生活水平和审美标准的不断提高，白皙与洁润的肌肤越来越受大多数女性所青睐。正因如此,皮肤美白抗衰老类化妆品市场的研发日趋重视，在市场中所占的份额却越来越大。 近代研究表明大豆异黄酮提取物对酪氨酸酶活性具有较强的抑制作用，可作为酪氨酸酶活性的有效抑制剂之一。大豆异黄酮广泛来源于大豆类植物中,这在一定程度上降低了产品的生产成本，研究大豆异黄酮类美白抗衰老意义显得非常有必要。 3 4 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 研究方法 2 分光光度法 本研究主要是通过体外实验，利用不同浓度的大豆异黄酮提取物溶液来抑制酪氨酸酶的活性，影响其反应过程中生成黑色素的量，依据生成物的吸光度来测定大豆异黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制率。 3 4 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 研究内容 3 3.1 大豆异黄酮简介 呈浅黄色粉末，气味微苦，略带涩味 大豆异黄酮属于异黄酮类，也是黄酮 类化合物中的一种。 药理作用 能降低血脂和抗氧化的功能，对于更 年期骨质疏松等症状有良好功效 具有预防癌抗癌、老年痴呆、心血管 疾病、乳腺癌、提高性生活质量。 物理性状结构 3.2 酪氨酸酶的结构 及其在黑色素形成过程中的作用 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 酪氨酸酶的结构 酪氨酸酶（Tyrosinase）是一种75kD复杂结构的含铜氧化还原酶，主要来源于胚胎神经鞘细胞，是黑色素代谢和儿茶酚胺的关键酶。 酪氨酸酶具有单酚酶活性和二酚酶活性，因此又称作多酚氧化酶。 酪氨酸酶是一种铜结合蛋白，结构中含有铜A和铜B双核铜活化位点,酪氨酸酶活性中心的双核铜中心结构见右图。 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 酪氨酸酶在黑色素形成过程中的作用 在黑色素形成的主要过程中，皮肤细胞中的酪氨酸被酪氨酸酶羟化，形成L-β-(3,4-二羟基)苯丙氨酸（L-DOPA，单酚酶活性）。之后，又把L-DOPA进一步氧化为多巴醌（DQ，双酚酶活性），生成的多巴醌：一种是继续转化成真黑素；另一种则与半胱氨酸作用转变成颜色稍浅的褐黑素，进而产生人体黑色素。 在整个形成过程中，酪氨酸酶催化作用主要发生在酪氨酸转化为多巴和多巴转化为多巴醌这两个反应，因此可通过加入一定的物质抑制酪氨酸酶的活性从而抑制或减少黑色素的生成。酪氨酸酶在黑色素形成过程中的作用就是通过抑制酪氨酸酶的活性，阻断酪氨酸向黑色素的转化达到美白皮肤的作用。 3.3 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用 的实验研究 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 酶的活性 定义 I%＝ [1－(Ad-Ac)/(Ab-Aa)] ×100% 代入a、b、c、d 四个反应体系 的吸光度值 Aa、Ab、Ac、Ad 提取物对酶的 相对抑制率 I%=（1－A1／A0）×100% a d c b 既无底物也无提取物的待测液 有底物但无提取物的待测液 无底物但有提取物的待测液 既有底物也有提取物的待测液 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 a d c b pH6.8的磷酸缓冲液(PBS) 不同浓度大豆异黄酮提取物溶液 0.0030mol/L L-酪氨酸溶液 酪氨酸酶溶液 酪氨酸酶抑制率测定 实验内容 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制作用的研究 毕业设计(论文)答辩 实验方法 用微量移液管分别按下表剂量准确移取a、b、c、d四组样液，置于37℃水浴 中恒温10 min。分别加入0.40mL酪氨酸酶溶液，迅速混匀并放置在37℃水 浴中反应10min后，迅速转移到比色皿中，测得反应液在475nm波长处的吸 光度Aa、Ab、Ac、Ad （均用缓冲溶液作对照）。 反应液的组成（单位：mL） 3 4 大豆异黄酮对酪氨酸酶抑制