槲皮素金属配合物合成附清除自由基能力研究设计性实验研究报告.docVIP

槲皮素-金属配合物合成及能力的研究 自由基是一类外层轨道含有未配对电子的原子团或特殊状态分子其中与人体关系最为密切的是氧自由基如超氧自由基(O-2·)羟基自由基(·OH)、脂质过氧化自由基(ROO·)等其中以O2-·形成最早·OH氧化性最强。通常自由基在机体内的生成和去除处于动态平衡状态不会对机体造成严重损伤但是当机体对自由基的清除能力减弱或自由基清除剂供给不足以及摄入生成自由基的物质过多时体内的自由基相对过剩会攻击生物大分子如蛋白质、核酸、脂质等使其交联或断裂进而破坏细胞的结构和功能导致机体病变、衰老和死亡。随着氧自由基和抗氧化理论研究工作的深入特别是一些合成的抗氧化剂在使用中存在一些毒性时天然抗氧化剂的研究越来越受到人们的重视。分子式：C15H10O7；分子量302.23；结构如下： 槲皮素广泛分布于蔬菜、水果、干果、饮料及中草药之中，槲皮素药理作用广泛,具有降血压、降血脂、扩张冠状动脉、抗血小板聚集、抗炎、抗过敏、抗氧自由基和抗心率失常等多种生物活性及药理作用。但由于槲皮素在水中溶解度低,极大地影响了槲皮素在生物体内的利用度。根据中药配位化学原理,中药有机成分与微量元素结合后往往会提高其生物活性或产生新的生物活性。作为金属螯合剂，黄酮类化合物在金属的生物可利用性方面起着重要的作用。将黄酮类化合物与人体必需金属元素形成配合物,并发挥其抗活性氧自由基的协同增效作用是较为全新的研究领域,为槲皮素的开发利用开辟了新的途径。本实验将合成的三种配合物[槲皮素铜(Ⅱ) 、槲皮素铁仪器磁力搅拌器、、分光光度计按适宜的摩尔比(与铜为21，槲皮素与酸锌、氯化铁均为11)，分别将金属盐溶液在搅拌下缓慢滴加到溶液中反复以除去其中残留的柚皮苷和游离的金属离子产生HO·自由基的反应体系是Fenton反应 H2O2 + Fe2+ → OH- + HO· + Fe3+ 自由基一般存活时间比较短而且活性高而水杨酸能有效捕捉HO·自由基且产生有色产物。因此若在该体系加入一定量的水杨酸将发生如下反应 产生的有色物质在510nm处有强吸收。添加水杨酸后立即测定吸光度值(此值可作为A0)。若在水杨酸捕捉自由基的体系中添加黄酮类物质由于黄酮类化合物具有清除HO·自由基活性从而降低甚至完全清除HO·自由基而使有色物质的浓度降低在此条件下测定吸光度值则可用来测定黄酮类化合物对HO·自由基的清除效率。 采用邻苯三酚自氧化法测定对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力。325nm处吸光值(A0-Ai)/A0×100% 4 数据记录与处理 4.1 槲皮素及槲皮素-金属配合物对羟自由基的清除作用测定 1.0*10~-4mol/L待测液 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 Vc 0.4850 0.0420 0.0360 0.0310 0.0290 0.0250 清除率 0.0000 0.9134 0.9258 0.9361 0.9402 0.9485 表1槲皮素对羟自由基的清除作用测定 图1槲皮素对羟自由基的清除作用测定 45 表2 槲皮素-铁配合物对羟自由基的清除作用测定 1.0*10~-4mol/L待测液 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 Fe 0.4850 0.0240 0.0180 0.0150 0.0100 0.0040 清除率 0.0000 0.9505 0.9629 0.9691 0.9794 0.9918 图2槲皮素-铁配合物对羟自由基的清除作用测定 表3 槲皮素-铜配合物对羟自由基的清除作用测定 46 1.0*10~-4mol/L待测液 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 Cu 0.4850 0.2010 0.1820 0.1400 0.0950 0.0620 清除率 0.0000 0.5856 0.6247 0.7113 0.8041 0.8722 图3 槲皮素-铁配合物对羟自由基的清除作用测定 4.2 槲皮素及槲皮素-金属配合物对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除实验 表1 槲皮素-金属配合物对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除测定 待测液浓度mol/L 参比（水） 1.0*10~-4 2.0*10~-4 3.0*10~-4 4.0*10~-