51几丁质酶活性及内切几丁质酶基因克隆与分析.PDF

　 犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 研 究 报 告 犚犲狊犲犪狉犮犺犚犲狅狉狋狊 狆 拟康宁木霉犜５１几丁质酶活性及内切几丁质酶 基因克隆与分析 尤佳琪， 李国庆 　 （华中农业大学作物病害监测和安全控制湖北省重点实验室，武汉　４３００７０） 摘要 木霉是一类重要的生防真菌，木霉产生的几丁质酶在其生物防治的重寄生过程中起着重要作用。拟康宁木 　 霉犜狉犻犮犺狅犱犲狉犿犪犽狅狀犻狀犻狅狊犻狊Ｔ５１是一株对番茄灰霉病有生防潜力的木霉菌株，本文测定了Ｔ５１菌株产生几丁质 犵 狆 酶的活性，结果表明 在 中液体培养以及与灰霉病菌在 上对峙培养时产生的几丁质酶活性显著受到 Ｔ５１ ＰＤＢ ＰＤＡ 灰霉病菌的诱导。采用ＲＡＣＥ技术首次克隆了拟康宁木霉Ｔ５１中一个几丁质酶基因犜犽犮犺犻狋４２，全长为１８１７ｂｐ， 包含 个外显子和 个内含子。预测该基因有一个 的开放阅读框，编码 个氨基酸，预测的蛋白总分子量 ４ ３ １２７５ｂｐ ４２４ 为 ，预测的等电点（）为 ，与 中 内切几丁质酶的氨基酸序列相似性达到 。 ４６．３７８ｋＤａ Ｉ ５．１６ 犜．犽狅狀犻狀犻犻 ４２ｋＤａ ９９％ ｐ 犵 关键词 几丁质酶； 拟康宁木霉； 基因克隆； 序列分析 　 　 　 　 中图分类号： 文献标识码： ： ／ Ｓ４７６ Ａ 犇犗犐 １０．３９６９．ｉｓｓｎ．０５２９ １５４２．２０１７．０４．００４ 　 　　 　 　　 　 ｊ 犆犺犻狋犻狀犪狊犲犪犮狋犻狏犻狋犪狀犱犲狀犱狅犮犺犻狋犻狀犪狊犲犲狀犲犮犾狅狀犻狀 犪狀犱狊犲狌犲狀犮犲 狔 犵 犵 狇 犪狀犪犾狊犻狊狅犳犜狉犻犮犺狅犱犲狉犿犪犽狅狀犻狀犻狅狊犻狊犜５１ 狔 犵狆 ， 犢狅狌犑犻犪犻 犔犻犌狌狅犻狀 狇　 狇 犵 （ ， 犓犲犔犪犫狅狉犪狋狅狉狅犆狉狅 犇犻狊犲犪狊犲犕狅狀犻狋狅狉犻狀牔犛犪犲狋犆狅狀狋狉狅犾狅犎狌犫犲犻犘狉狅狏犻狀犮犲 狔 狔犳 狆 犵 犳狔 犳 ， ， ） 犎狌犪狕犺狅狀犃狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋 犠狌犺犪狀 ４３００７０ 犆犺犻狀犪 犵 犵 狔 　 犃犫狊