呼吸道标本的处理方法.ppt

呼吸道标本的处理程序 王勇 内容简介 上呼吸道标本标准操作程序（SOP） 下呼吸道标本标准操作程序（SOP） 痰标本的规范化操作（草案） 上呼吸道标本处理程序 大部分步骤需要在生物安全柜内接种 细菌性咽炎的实验室诊断 原理 大多数上呼吸道感染是由病毒引起的。细菌性咽炎经常是由化脓性链球菌引起。但重度的会厌炎和喉气管炎则是例外，其一般是由于b型流感嗜血杆菌引起。 标本 从扁桃体和后咽部采集标本的咽拭子 选择性培养基（如表1） 5%羊血琼脂 含抗生素的Thayer Martin 琼脂（GC+）和无抗生素的GCO(仅用于淋病奈瑟菌病例) 巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例） 质量控制 培养基使用之前，QC由培养基组负责。  上呼吸道标本处理程序 培养程序 在1/6琼脂表面用力滚动拭子，并划线分离。 在一区用接种针穿刺血平板几次。（图1） 把平板放置在5%CO2培养。 下呼吸道标本的处理 大多数标本需要在安全柜内操作 常规细菌培养 原理 下呼吸道感染包括支气管炎，细支气管炎和肺炎。以上炎症，特别是肺炎，可以引起严重甚至是致命的疾病。虽然病毒，支原体，立克次(氏)体和真菌都可以引起下呼吸道感染，但细菌是主要的病原体，其所占的比例要比上呼吸道感染要高很多。 下呼吸道标本的处理 下呼吸道标本培养的常见病原菌 革兰阳性菌 革兰阴性菌 金黄色葡萄球菌 脑膜炎奈瑟氏菌 化脓性链球菌 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 肠杆菌科细菌 结核分支杆菌 非发酵菌 白喉棒状杆菌 嗜肺军团菌 假丝酵母菌 下呼吸道标本的处理 标本 痰 气管或经气管壁抽吸物 支气管标本 支气管灌洗液，毛刷，活检标本 下呼吸道标本的处理 材料 培养基 5%羊血平板 巧克力平板 中国兰 念珠菌显色培养基 试剂 Sputasol（OXOID） 下呼吸道标本的处理 质量控制 培养基使用之前，QC由培养基组负责。 操作程序 肉眼观察 记录痰标本的外观并记录在申请单背面。 外观描述及简写如下： 唾液（S） 带血 （BS） 粘液状（M） 水样（W） 粘液脓性的（MP） 脓痰（P）脓性粘液痰（PM） 拒收“唾液”标本并报告“标本不适合用于进一步处理”“请重留” 下呼吸道标本的处理 显微镜检 用拭子取所有类型标本的脓液部分涂片，（最好在60度热固定涂片2小时），并准备革兰染色 低倍镜下检查涂片（10倍目镜）；定量计数10个视野下鳞状上皮细胞和白细胞平均数。按照表1分级标准记录在工作表上。 低倍镜下细胞计数（10个视野平均数） 如果标本要求革兰染色，在100倍目镜下检查病原体并记录在工作表上 对涂片显示上皮细胞占优势，（3+）丢掉标本并报告“涂片显示口腔正常菌群污染”“标本不适合用于进一步处理”“请重留” 培养程序 水样痰标本 直接接种到培养基，并划线分离 脓性标本（特别是痰）-匀浆化 Sputasol（OXIDE）的配制 无菌操作下，取瓶中的液体1.5ml，加入到18.5 ml无菌水中。无菌条件下2-8℃至少稳定48小时 痰液化的常规操作程序。 痰液中加入等体积的稀释后SPUTASOL 旋涡振荡标本20-30 s， 并置室温15分钟 再次旋涡振荡是标本达到进一步液化。准备立即接种标本。 用拭子取混悬液到培养基，并划线。 支气管灌洗液（BAL）的定量培养 旋涡振荡BAL并用0.01 ml定量接种环接种到平板上。 放置在5%CO2培养箱内 您可能每天面临以下问题的挑战 痰标本分离出4种细菌做哪一种细菌的药敏试验？ 数量很多的凝固酶阴性葡萄球菌在痰里分离出来是否要做药敏? 临床微生物实验室规范操作草案 草案分七部分 标本采集和运送的规范条例 培养前标本质量检测规范 标本接种规范条例 细菌鉴定基本流程规范条例 细菌药物敏感试验规范条例 实验室质量控制 细菌报告规范条例等 第一部分标本采集和运送 标本采集和运送是细菌培养成功的最重要的关键! 但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题，为此建议来一次革命，用输送培养基代替传统的标本的容器。 痰标本的采集和运送条例 标本采集时间：用抗生素前；晨痰; 采集方法： （1）自然咳痰：用清水漱口3次，应包括咽喉部，用力咳出痰，与灭菌容器中或输送培养基中。 痰标本的采集和运送条例 （2）帮助咳痰：不易获得痰的患者可雾