自身免疫病及免疫检验课件.ppt

可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen，ENA) 是盐水可提取性核抗原的总称，是非组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量的RNA和多 肽组成。 抗ENA抗体 对类风湿有特异诊断价值的ENA： 抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体； 抗Sm抗体； 抗SSA抗体； 抗SSB抗体； 抗Scl-70抗体； 抗Jo-1抗体； 抗核糖体抗体 。 核蛋白(DNP) 由DNA和蛋白质组成。DNP抗原有不溶性及可溶性两种，分别产生相应的抗体。 检出 百分 率 抗 DNP 20 40 60 80 SLE 非活动期 SLE 活动期 抗不溶性DNP抗体 抗 DNP 抗 DNP 100 RA滑 膜液中 抗 DNP 抗可溶性DNP抗体 （1）抗DNP抗体 抗核小体抗体（anti-nucleosome antibody，AnuA) 核小体是细胞核染色质的基本组成单位; 细胞凋亡致核小体大量蓄积，并诱导B细胞产生AnuA AnuA是SLE特异的标志性抗体。 抗dsDNA抗体 抗核小体抗体 抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性 率为60%～80%，特异性＞97%。 （2）抗核小体抗体 常见AID的ANA阳性检出率 疾病 ANA（%） 疾病 ANA（%） SLE ≥95 SS 70～80 MCTD ≥95 PM/DM 30 PSS 85～95 RA 20～30 2.ANA的检测方法 稀释患者血清可做定量检测，1:80稀释仍呈阳性对诊断SLE有较大参考价值。 （1）间接荧光免疫法 抗核抗体核型与相关疾病 核型 荧光图形 抗体 相关疾病 周边型 核周环状荧光 抗dsDNA SLE、慢活肝炎 均质型 核呈均质荧光 抗DNA、AHA、 AnuA SLE、RA、PSS、慢性肝病 斑点型 核内颗粒状荧光 抗ENA MCTD、SLE、PSS、SS、PM 核仁型 核仁有荧光 抗核仁抗体 PSS、雷诺现象、SLE 着丝点型 核浆细小相同颗粒荧光 抗着丝点 PSS、CREST综合征 均质型 抗核抗体核型 着丝点型 核仁型 斑点型 用间接ELISA检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。 （2）ELISA法 SDS加待检血清 形成分子大小不同区带 分离 电转移 PVDF膜或NC膜 抗ENA与相应抗原特异结合 抗人IgG·HRP ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP （3） 免疫印迹法 显色并判读结果 类风湿因子(rheumatoid factor，RF): 抗变性IgG的自身抗体，可为19S的IgM，也可为7S的IgG和IgA。 可与人变性IgG结合，但不与正常IgG发生凝集。 RF可在RA患者检出，约70%～90%的血清、约60%的滑膜液可检出IgG类的RF； （二）类风湿因子测定 IgG类抗体与相应抗原结合后发生变性； 炎症过程亦可发生IgG变性，构成自身抗原，刺激机体产生各种抗IgG抗体； 滑膜液中的IgG类RF与变性IgG结合可形成中等大小的免疫复合物，相比血清中的IgM类RF更易致病。 RF检测方法 最常采用的检测方法。 以吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上的IgG作诊断试剂，与待检血清中的RF结合后，出现胶乳凝集颗粒。此法的灵敏度和特异性不高，且只能检出血清中的IgM类的RF。 1.间接胶乳凝集试验 稀释待检血清至一定浓度后，加入定量的变性IgG诊断试剂，即用透射比浊或速率散射比浊仪，检测血清中的RF。此法快速、敏感性高、精密度高、稳定性好、可定量分析，但仍只能检测IgM类RF。 2.免疫比浊法 IgM、IgG和IgA类RF可用ELISA检测，临床上多采用双抗原夹心法或间接ELISA进行测定。 3. ELISA法 （三）其他自身抗体测定 其他自身抗体的检测方法与临床意义 自身抗体的类型 检测方法 临床意义 抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG) 荧光免疫法、ELISA、RIA 桥本甲状腺炎 抗甲状腺过氧化物酶抗体 ELISA Graves 病,桥本甲状腺炎 抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ELISA、RIA 重症肌无力 抗平滑肌抗体(SMA) 荧光免疫法、ELISA、RIA 自身免疫性肝炎,慢性活动性肝炎, 原发性胆汁性肝硬化 抗线粒体抗体(AMA) 荧光免疫法、ELISA、RIA RA，SS，SLE，原发性胆汁性肝硬化, 慢性活动性肝炎,持续性肝阻塞 抗胃壁细胞抗体 荧光免疫法 恶性贫血 抗胰岛素抗体（IAA） ELISA 胰岛素依赖性糖尿病 抗精子抗