诊断学溶血性贫血检测诊断学第7版幻灯片.ppt

(四)自身免疫性溶血的检验 1. 抗人球蛋白试验 ( Coombs’ test) 【原理】不完全抗体，无法连接两个邻近的红细胞而只能和一个红细胞抗原相结合。用正常人血清免疫家兔，获得抗人球蛋白血清。抗人球蛋白是完全抗体，可与多个红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象，称为抗人球蛋白试验阳性。 直接抗人球蛋白试验：检测红细胞表面结合有不完全抗体。 间接抗人球蛋白试验 ：检查血清中有无游离的不完全抗体。 Autoimmune hemolytic anemia, AIHA 抗人球蛋白 IgG不完全抗体 RBC 将病人血清和正常RBC混合，再加入抗IgG试剂 病人 血清 RBC 抗IgG 【参考值】正常人直接、间接均抗人球蛋白试验均阴性 【临床意义】 1）阳性见于AIHA， 新生儿溶血病，SLE等 2） AIHA大多为IgG （温抗体型 37℃条件下作用最强 ），少数为IgM (冷抗体型 4℃条件下进行试验) 3）间接试验主要见于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血病母体血清中不完全抗体检测。 2.冷凝集试验 【原理】机体存在抗自身红细胞抗体，在低温时与相应抗原结合，使红细胞凝集，特别是在4℃时最强烈，但温度升高到37 ℃后凝集消失，称为冷凝集试验。 【参考值】效价1：40 【临床意义】某些AIHA，传染性单核细胞增多症、恶性淋巴瘤等可阳性。动态检测，凝集效价增高4倍以上较有诊断价值。 （五）阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (paroxysmal nocturbal hemoglobinnuria, PNH) 系获得性的红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血，常睡眠时加重，可伴发作性血红蛋白尿和全血细胞减少症 1. 酸溶血试验 (Ham试验) 【原理】膜蛋白缺陷的红细胞对补体敏感增加，在弱酸血清（pH6.6~6.8）中，经37℃ 孵育后红细胞发生溶血。 【临床意义】正常人阴性，阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）。该法敏感性较高。特异性高。 Ham试验 PNH不同时间尿样 2.蔗糖水溶血试验 【原理】 蔗糖离子浓度低，增强补体与红细胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进入红细胞而致溶血。 【临床意义】正常阴性。PNH本试验常为阳性。可作为PNH筛选试验，阴性可排除，阳性应作Ham 试验。 3.蛇毒溶血试验 【原理】 蛇毒因子是种溶血因子，能直接激活补体C3，激活补体系统，造成溶血。 【参考值】 溶血度5% 【临床意义】 阳性提示PNH。 PNH诊断 1.初筛试验 血管内溶血的特点： 血浆游离血红蛋白增高，结合珠蛋白(Hp)降低，血红蛋白尿及尿中出现含铁血黄素等 2.诊断试验 酸化血清溶血试验(Ham’s试验)、蔗糖溶血试验、蛇毒因子溶血试验等 总结 第一步 确定是否有溶血（筛查检测） 1 红细胞破坏增加 2 红细胞代偿性增生 第二步 哪一类溶贫（病因检测） 1 红细胞膜缺陷的检测 2 红细胞内酶缺陷的检测 3 异常血红蛋白的检测 4 自身免疫性溶血的检测 5 阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关检测 思考题 哪些实验室检查提示血管内溶血？ * 周有利武汉科技大学 临床学院诊断教研室 溶血性贫血常用的实验室检查 溶血性贫血（hemolytic anemia）概念 各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，骨髓造血功能不能相应代偿所发生的一类贫血叫溶血性贫血。 指骨髓代偿能力足以补偿红细胞的损耗而不出现贫血时称溶血性疾患。 溶血性贫血的分类 按发病机制分类 1. RBC内在因素（遗传性性） RBC膜缺陷：遗传球、PNH RBC酶缺陷：G-6PD缺乏症 珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋白病 2. RBC外在因素（获得性） 免疫性溶贫: AIHA 、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相关抗体 机械损伤性：DIC 、 TTP、人造瓣膜 感染：疟疾 物理因素：灼伤 毒素：蛇毒 脾亢: 单核巨噬细胞功能亢进 按溶血发生部位分类（RBC破坏场所） 血管内溶血：RBC在血管内破坏 见于DIC、机械性微血管病变、烧伤、输血、PNH 血管外溶血：RBC在单核-吞噬细胞系统吞噬或破坏 AIHA，遗传性球形细胞增多症 溶血性贫血的分类 溶血性贫血检测 第一步 确定是否有溶血（筛查检测） 1. 红细胞破坏增加 2.红细胞代偿性增生 第二步 哪一类溶贫（病因检测） 一、溶血性贫血的筛查检测--确定是否有溶血 血浆游离血红蛋白测定 血清结合珠蛋白 血浆高铁血红素白蛋白试验 尿含铁血黄素试验 血红蛋白尿测定 外周血红细胞形态改变 红细胞代偿增生