临床相关微生物实验室规范化管理.ppt

临床微生物实验室规范化管理 （一）新传染病的不断出现 使临床对感染性疾病的诊断和治疗陷入了困境 （二）多重耐药细菌的出现 随着抗生素的广泛应用，我国已经提早步入抗生素高水平耐药的国家行列，某些菌株的耐药性甚至位居全球之首 及时、准确的病原菌诊断—正确的形态学分析与病原鉴定，具备疑难病原确认技术 细菌耐药性监控—标准的抗药性检测与结果解释 医院感染的监控 —能快速反应医院感染与应急事件 必须规范临床微生物实验室的管理 参考CLSI 文件从以下7方面提出建议 标本采集和运送的基本规范； 培养前标本质量检测基本规范 标本分离的基本规范 细菌鉴定基本规范； 细菌药物敏感试验基本规范； 实验室质量保证基本规范； 细菌报告基本规范； 一.标本采集和运送 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键 微生物人员和临床医护人员一道，根据临床微生物检验规范的规定，研讨和制定本院微生物标本采集、保存和运送的具体要求。 要广泛宣传，认真实施，建立健全标本验收制度，对于不合格的标本要坚决退回，说明原因，要求重送。 美国与欧洲对实验室的新要求 1.痰标本的采集和运送 1. 标本采集时间：用抗生素前 2. 采集方法： 自然咳痰：必须用请水漱口3次，应包括咽喉部，立即用力咳出痰，于灭菌容器中或输送培养基中。 支气管镜或支气管毛刷:由医生采集，建议直接种入输送培养基 2.泌尿标本的采集和运送 1．采集后的标本应立即送检。 2．采集时间：多数药物从尿道排泄，所以不管用哪种方法都应在用药前采集。应采集早晨第一次的尿。 3 标本管不应含防腐剂和消毒剂。 4.长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 5. 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。 3.分泌物的采集和运送 1. 对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。 2. 闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等，对封闭的脓肿常采用穿刺或引流的的方法采样，应在用药前采集，应注意脓液的气味、性状、颜色注意厌氧菌存在的可能。不能及时送检应应用输送培养基。 4.便标本的采集和运送 1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采；厌氧菌出现症状即采集。 2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接盛于增菌液或保存液中；对不易获得粪便患者及幼儿，可用直肠拭子采集后置保存液或输送培养基中送检。 便标本的采集和运送 ???注意事项： ⑴虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用无菌容器。 ⑵在患者病情许可的条件下应在用药前采集标本。 ⑶应床边接种或置输送培养基送检。 ⑷厌氧细菌（难辩梭菌）培养的标本应尽量减少与空气接触。 5.厌培养标本的采集和运送 1.痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不能用于厌氧培养。 2.尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养 3．便标本厌氧培养标本采集： 可用排出的便做厌氧培养但也应少与空气接触。 6.血液及骨髓标本的采集和运送 1.?采血时间：尽可能在用抗生素前，心内膜炎例外。 2. 采血量：至少应采一套2瓶，分需氧和厌氧。血量按培养瓶要求，先将1注入需氧瓶，再将剩余血注入厌氧瓶。 3. 采血方法：不要与血气和血沉标本一起采血；不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜在静脉导管或静脉留置口采血。 血液及骨髓标本的采集和运送 4.?采血间隔：如第一次采集2套（4瓶）血培养标本，在以后的2-5天不必采血，但除外心内膜炎和导管相关性败血症。 5.? 儿童：采血量是总血量的1%。 6.?延迟培养瓶处理: 延迟培养瓶不要放冰箱或孵箱，放常温，尽早送往临床细菌室。 7.?皮肤消毒液推荐：建议先用70-80%异丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定消毒。 二.标本培养前的基本规范 1.痰培养标本 实验室在接种前必须作痰涂片革兰染色， 当在低倍镜下白细胞10个/LP、上皮细胞25个/LP时应作为不宜做培养的标本； 当白细胞 10个/LP，上皮细胞 25个/LP时再参照油镜观察标本中细菌分布作出判断。 痰培养标本 当标本中细菌种类超过3种以上，未见到纤毛状柱上皮细胞，作为不合格标本； 如见到数量不等的白细胞或纤毛柱状上皮细胞或两者同在，含1-2种不同细菌，可考虑继续培养，结果可根据病情再作分析； 当涂片中见到1-3种细菌，少量的扁平上皮细胞，少量或较多钎毛