抗菌药物使用的合理性、如何解读临床相关微生物药敏结果以及常见的耐药机制.ppt

抗菌药物使用的合理性如何解读临床微生物药敏结果及常见的耐药机制 齐齐哈尔北钢医院检验科 李孟一 抗菌药物使用的合理性的意义 一、加强围手术期抗菌药物预防应用的管理 二、加强对氟喹诺酮类药物临床应用的管理 三、严格按照抗菌药物分级管理制度规定，加 强抗菌药物临床应用的管理 四、加强对抗菌药物临床应用的指导和监管 加强对抗菌药物临床应用的指导和监管 地方各级卫生行政部门要高度重视辖区内细菌耐药监测情况，严格执行抗菌药物分级管理规定，根据《卫生部全国细菌耐药监测2006-2007年度报告》（附件2）的监测结果，结合本地实际情况，逐步建立抗菌药物临床应用预警机制，采取相应的干预措施： （一）对细菌耐药率超过30%的抗菌药物，应将预警信息及时通报有关医疗机构和医务人员。 （二）对细菌耐药率超过40%的抗菌药物，应该慎重经验用药。 （三）对细菌耐药率超过50%的抗菌药物，应该参照药敏试验结果用药。 （四）对细菌耐药率超过75%的抗菌药物，应该暂停该类抗菌药物的临床应用，根据细菌耐药监测结果再决定是否恢复临床应用。 我国抗菌药物耐药现状 肺炎链球菌耐青霉素(PRSP):前所未有的速度在增加，大城市达40％～50％； 化脓性链球菌对大环内酯类耐药明显增加； 医院MRSA 60％～90％； 大肠杆菌对环丙沙星耐药60%，铜绿假单胞菌耐环丙沙星30％+； ESBLs 20％～50％； 铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药达30％±(ICU) 全球关注的高耐药多重耐药菌 多重耐药结核分枝杆菌 MDR-TB 甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌 MRSA 万古霉素耐药金黄色葡萄球菌 VRSA 万古霉素耐药肠球菌 VRE（VREF） （万古霉素耐药屎肠球菌） 青霉素耐药肺炎链球菌 PRSP 三代头孢菌素耐药的肠杆菌科阴性杆菌 3.可从抗菌作用与敏感率比较中找出对耐药菌有效抗菌药物。 4. 为研究开发新药提供重要线索或思路，促进新药开发。 5. 促进细菌检验质量，提高细菌学诊断水平。 药敏试验在感染性疾病防治中的意义 近年来，由于各种抗菌药物的广泛应用，导致耐药菌株的迅速增多。尤其是广谱及超广谱抗生素的普遍使用，造成耐药菌株大量出现，给临床治疗带来极大的困难。同时，由于不合理的使用抗生素，治疗的失败率及不良反应均有增加。因此，药敏试验在感染性疾病的防治方面具有日益重要的实际意义。 细菌培养+药敏的目的 1、 确定导致感染的病原菌的种类，对于不同的病原菌（G-杆菌或G+球菌，条件致病菌或急性传染病病原菌）需要采取不同的治疗措施。 2 、 确定病原菌对各种抗生素的敏感性，指导临床根据病人情况合理用药。由于细菌耐药性的快速增长，单纯依赖经验选用药物经常无效，在更多的时候需要参考药敏实验的结果。 3、用于流行病学调查及院内感染的监控，减少耐药菌株的流行。 一、纸片扩散法 （一）试验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种 测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药 物吸收琼脂中水分，溶解后不断向纸片周 围扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围 抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制， 从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的 敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负 相关关系，即抑菌圈愈大，MIC值愈小。 (二)培养基和抗菌药物纸片 1．抗菌药物纸片 选择直径为6.35mm， 吸水量为20μl的专用药敏纸片，用逐 片加样或浸泡方法使每片含药量达规 定要求。含药纸片密封贮存于2℃-8℃， 且不超过1周。 2．培养基 水解酪蛋白（M-H）培养基是 兼性厌氧菌和需氧菌药敏试验标准培 养基，4℃保存。 1.用接种环分别在琼脂平板上挑取形态相似 的大肠杆菌菌落4～5个，接种于3～5mL肉汤管中 2.35℃温箱培养2～8h，与标准比浊管比较，若菌液浓度太浓时，可用肉汤或生理盐水稀释至与0.5麦氏标准比浊管浊度相同 3.在15min内，用无菌棉签蘸取菌液，并在管壁上挤去多余的菌液后涂布于M-H琼脂平板上（注意：涂布要均匀、致密），待干 4. 用镊子蘸取95%乙醇并通过火焰，待烧干后再蘸取乙醇重复上述操作，共三次即可达到灭菌的效果。待冷却后，用此无菌镊子夹取不同药敏纸片，按一定间隔贴在平板的不同区域，即两纸片间距不小于24 mm，纸片距平板边缘不小于15mm。 5. 35℃温箱培养18～24h观察结果。 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细 菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实 验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释， 能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最 小抑菌