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第五章-发酵工艺控制
第七章 发酵工艺的控制;;二、发酵过程的中间分析;按性质分可分三类:
物理参数:温度、搅拌转速、空气压力、空气流量、溶解氧、表观粘度、排气氧(二氧化碳)浓度等。
化学参数:基质浓度(包括糖、氮、磷)、pH、产物浓度、核酸量等。
生物参数:菌丝形态、菌浓度、菌体比生长速率、呼吸强度、基质消耗速率、关键酶活力等。;从检测手段可分为:直接参数、间接参数
直接参数:通过仪器或其它分析手段可以测得的参数,如温度、pH、残糖等。;(1)糖含量;(2)氨基氮和氨氮;(3)菌浓度和菌形态
直接反映菌生长的情况。
菌形态:显微镜观察。
菌浓度的测定是衡量产生菌在整个培养过程中菌体量的变化,一般前期菌浓增长很快,中期菌浓基本恒定。补料会引起菌浓的波动,这也是衡量补料量适合与否的一个参数。;菌浓测定方法
测粘度
压缩体积法(离心)
静置沉降体积法
光密度测定法 OD600~660 适合于细菌、酵母;(4)产物浓度 ;(一)温度对发酵过程的影响及其控制;温度对微生物细胞生长的影响;温度对产物形成的影响;温度影响发酵液的理化性质;温度影响生物合成的方向(影响代谢途径方向);温度对酶的影响;2、影响发酵温度变化的因素
发酵热:发酵过程中释放出来的净热量。
发酵过程中,随着菌体对培养基成分的利用,菌体进行氧化代谢所释放的能量一部分被利用,其余则变成热能放出;机械搅拌的作用产生的热量和因罐壁散热,水分蒸发等也带走部分热量。;发酵过程中产热和散热的因素:
(1)发酵热:Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射
发酵热的测定及计算:
通过测量一定时间内冷却水的进出口温度差来计算:Q发酵=GC(t2-t1)/V;;Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射;3、最适温度的选择
最适温度的选择依据
最适发酵温度Tm发酵:最适菌体生长温度+最适产物合成温度(Tm生长+Tm合成)。
Tm生长和Tm合成往往不一致。
Tm发酵还与菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段而改变。
温度选择应考虑的因素
●通气条件的好坏,解释说明。
●培养基成分不同和浓度不同,解释说明。
;举例:
谷氨酸发酵(菌最适生长温度30℃~34℃;谷氨酸合成最适温度36℃~37℃)
温控方案:生长初期,主要促使菌丝迅速生长繁殖;30℃~34℃为主;产物分泌期,主要合成产物、积累产物;温度提高至36℃~37℃为主。
乳酸链球菌发酵(菌最适生长T:34℃;产酸最适T:30℃)
温控方案:生长初期,主要促使菌丝迅速生长繁殖;34℃为主;产物分泌期,主要合成产物、积累产物;30℃为主。
;具体控制方案:30℃, 5h →25℃, 35h →20℃, 85h →25℃, 40h;产量提高14.7%。
;4、最适温度的控制方法
工业上控温一般不需加热,而是冷却。
冷却方式:夹套或蛇形管中通入冷却水,通过热交换来降温,利用自动或手动调整冷却量以保持恒温发酵。;换热类型;(二)pH对发酵过程的影响及其控制;pH影响菌的生长速率;pH影响菌体生物合成方向;pH影响发酵液的理化性质;;;;;;;;;(三)溶氧对发酵的影响及其控制;;;;;;;;;;控制溶氧主要方法的比较表
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