一个链霉菌菌株培养滤液的抗菌活性研究.pdfVIP

490 中国植物病理学会2006年学术年会论文集 一个链霉菌菌株培养滤液的抗菌活性研究 on ‘Studiesthe of metabolieofa fungicidalactivitysecondary Streptomyces isolateD．35 朱宏建高必达 (湖南农业大学生物安全科学技术学院，湖南长沙410128) 摘要：从湖南壶瓶山自然保护区土壤中分离得到285个放线菌菌落，经初步筛选后的菌落发酵液滤液对 烟草青枯病菌、稻瘟病菌、烟草炭疽病菌、烟草黑胫病做了平板抑菌试验。结果表明，一株编号为D．35 的链霉菌的发酵液经细菌过滤器过滤后在培养平板上对稻瘟病菌，烟草黑胫病，柑橘炭疽病菌的生长均 有较强的抑制作用，在每个培养平板中加入3ml滤液时，茵丝抑制率分别达47．6％、49．3％和54．2％。该 菌株对烟草青枯病也有明显的抑制作用，在每个平板正中的滤纸片上滴加20I_tl滤液时，抑菌圈直径达8 mm。初步的盆栽试验在人工气候室进行，发酵液稀释2倍、5倍、lO倍灌根对烟草黑胫病的抑制效果为 57．5％、55％和47．5％。发酵液稀释25倍和50倍喷雾对烟草黑胫病的防效为86．80／．和65．8％。 关键词：链霉菌；抑菌活性；植物病害；生物防治 放线菌是产生抗生素活性物质最大的一类微生物。迄今已知的抗生素中，有2／3是由 放线菌产生的，不少抗生素已用于防治农作物有害生物，如井冈霉素、春雷霉素等【l】，植 物病原真菌的侵染是引起植物病害造成作物减产的重要原因。目前对植物病害的防治主要 采用化学农药杀灭病原菌，但化学农药对人畜的毒副作用和残留问题至今仍难以有效的解 决。利用链霉菌产生的抗病原真菌的活性物质【2J进行植物病原真菌病害的生物防治，则具 有周期短、易于研究、便于生产、无毒无害等优点13】。研究发现湖南壶瓶山区土壤中筛选 得到一株链霉菌，其代谢产物对植物病原菌具有较高的抑菌活性。 1材料和方法 1．1实验材料 1．1．1供试菌株来源 混合过筛，室温下风干，待分离。 1．1．2培养基 放线菌分离用高氏一号培养基，真菌和卵菌菌丝抑制试验用PDA培养基，细菌生长 均匀后倒平板，制成含有抑制剂的选择分离培养平板[41。 1．1．3供试病原茵 烟草青枯病菌(Pseadomonas solanacearum)，稻瘟病菌(Piriculariaoryzae)，烟草黑胫病 Penz．)用于离体生测， (Phytophthoraparasitica)，柑橘炭疽病菌(Colletotrichumgleosporioides 生物防治491 盆栽试验以烟草黑胫病为活体测定供试病原菌。所有供试病原菌由湖南农业大学植物疾病 控制研究所提供。 1．1．4烟草品种红花大金元 1．1．5烟草苗的准备选择长势大小相同，苗龄40d的烟苗，移栽。 1．2实验方法 1．2．1分离方法 ’ rain，用无菌移液管吸取lml上清夜，加入已装 瓶中，振荡20rain(10d稀释液)。静置l 的培养基平板上，用无菌玻璃刮刀涂匀，静置30rain后，将培养皿在28～30℃的温箱倒 置培养。用接种环将选定的单菌落分别移殖到高氏一号琼脂斜面上，4。C条件下保存。 1．2．2初步的拮抗性测定 对真菌性病害采用平板对峙法【5】，用打孔器将指示菌和拮抗菌株打成4～5mm小菌 块，在PDA平板中央放置指示菌菌块，在具中央3．5cm的圆周上等距离放置4块拮抗菌。 放入28℃温箱培养5d。用十字交叉法测量抑菌圈直径，并观察抑菌圈透明程度和边缘整 齐程度。 对细菌性病害(烟草青枯病菌)，将振荡培养24h的青枯菌菌悬液加入到PDA培养 上采用点接法接种鉴定菌。测量抑菌圈直径，并观察抑菌圈透明程度和边缘整齐程度。 1．2．3培养平板抑茵试验