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Thorlabs多光子显微镜系统
Thorlabs 多光子显微镜系统
Thorlabs的MPM200系列多光子显微镜是可以满足活体生物厚样品成像需求
的平台。此系统能够胜任小如生物组织、大如整个活体生物的样品成像。Thorlabs
MPM200多光子显微镜能够为宽场透射光显微、落射荧光成像和精细多光子技术提
供通用的解决方案,从而最精密地还原样品数据。Thorlabs提供从物镜到抗振工
作台的全系列产品,使用户可以根据成像需求和预算构建最理想的系统。
Thorlabs多光子显微镜产品线具有如下几个特性
光源波长范围为680-1400nm,扫描速度达到30帧每秒(分辨率为512 x 512
像素),采用全视场非退扫描探测器(Non-Descanned Detectors),支持低放大
倍数/高NA的生理学物镜,可供应双通道、四通道和四通道预备系统,开发了一
套直观易操作的图像采集软件。
多光子显微镜的原理
当两个或多个光子同时到达荧光团并且其能量总和满足跃迁能级时就会产
生多光子激发效应。当荧光团经过微小的无辐射损耗,跃迁回到基态时,就会发
射出一个新的光子。二次和三次谐波产生(分别为SHG和THG)在入射光子同时湮
灭并且产生一个能量等于之前光子总和的新光子时才会出现。
双光子激发和二次谐波产生(SHG)都是非线性过程,其信号的产生取决于
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激光光强的平方(I ),而光子激发和三次谐波产生(THG)则与激光光强的三
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次方有关(I )。非线性特性要求聚焦在样品上衍射极限点的激光脉冲具有高光
子密度,生成的输出信号绝大部分被限制在物镜的焦平面上。这样一来,就可以
获得厚样品中的光学切片图像。通过物镜沿着样品深度方向进行移动并采集对应
的切片图像,对切片图像进行三维重构即可得到被测试样的三维图象。
图1 非线性过程图解
Thorlabs多光子显微镜系统的组成部分如下作详细介绍。
1.多光子系统
图2 MPM200-2多光子系统
MPM200-2双通道多光子系统适合生物医学成像的应用。MPM200系列产品的快
速扫描特性使它们可以在更短的时间内采集更多的数据,这样就可以在整个实验
过程中保持样品的活性。系统中的两个高灵敏度非退扫描探测器可以将信号的探
测效率最大化,从而具有更深的成像深度并减少对样品的损伤。其专用的多光子
光路使其可以使用多种激发光源和不同厂商生产的高数值孔径物镜。
MPM200-4在MPM200-2的基础上增加了两个光电倍增管来提高成像能力,它们
位于透射光探测模块 (TLDM)中的聚光镜下方。额外的两个探测通道含有两个带
全视场采集光学元件的高灵敏度GaAsP光电倍增管。子平台聚光镜作为一个对立
物镜,可以采集前向传播的信号。除了采集荧光信号外,TLDM还可以用来采集二
次和三次谐波信号。
2.色散补偿单元
图3 色散补偿单元及其光路图
Thorlabs多光子显微镜系统的色散补偿单元基于啁啾镜技术,用以保持样品
上的激光脉冲宽度。它的特点是易于嵌入集成,输入和输出共线。
3.光束调节单元
图4 光束调节单元及其光路图
光束调节单元的作用是自动控制激光功率和光束直径,它可以完全集成于
ThorImageLS™软件中,自动功率线性变化功能用于产生Z轴图像堆叠,并实现稳
定的光学对准。
4.生理学平台与ScienceDesk光学平台
图5 生理学平台和ScienceDesk平台
生理学平台采用高度可调的U形UltraLight™系列面包板,可以使观察者在
270°范围内观测样品,它包含显微镜平移台,手动平移台,电动平移台和编码
电动平移台。U型面包板带有密封孔以防止渗漏,可容纳多种样品盒。
5.Burleigh®微操作控制器
图6 Burleigh®微操作控制器
Burleigh®微操作控制器应用压电技术实现精确位移,超精密定位无漂移,
卓越的稳定性。
6.多光子显微物镜
图7 多光子显微物镜
Thorlabs同时供应一系列特别适合于多光子成像
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