不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的影响研究-日用化学品科学.PDF

科技广场 Technique express 不同来源胶原肽对光老化皮肤 成纤维细胞的影响研究 1 2 2 1 1 2 2 邵 茜 ，付雪媛，徐 慧 ，潘松浩，邹鹏飞，王长伟，刘楚怡 （1. 烟台新时代健康产业日化有限公司，山东 烟台 264006；2. 青岛海洋生物医药研究院，山东 青岛 266073） 摘 要： 比较研究了海蜇、牛骨和鳕鱼皮3种不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的修复作用。发现 3种胶原肽均可显著提高光老化细胞的细胞增殖活性，经紫外照射后，人皮肤成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ P 0.01），同时细胞内抗氧化酶 型胶原蛋白及透明质酸合成量明显降低，表现为差异性极显著（ 系T- SOD、CAT和GSH- Px的抗氧化酶活力也都降低。当加入3种胶原肽后，光老化细胞的Ⅰ型、 Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量与细胞内T- SOD、CAT和GSH- Px酶活力均有所增加，且改善光 老化细胞内抗氧化酶活力与增加细胞胶原分泌效果较好的是海蜇胶原肽。 关键词：海蜇胶原肽；牛骨胶原肽；鳕鱼皮胶原肽；光老化；人皮肤成纤维细胞 中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1006- 7264（2017）05- 0026- 04 DOI：10.13222/j.cnki.dc.2017.05.007 老化（Photoaging ）表现为皮肤暴露部位粗燥、皱 代股份有限公司；皮肤成纤维细胞HSF ，北京协和细胞中 光纹加深加粗、结构异常、不规则性色素沉着、真 心；胰蛋白酶、碱性蛋白酶，南宁庞博生物工程有限公 皮弹性纤维变性及降解产物蓄积等[1] 。已有研究 司；DMEM培养基，Gibco公司；胎牛血清、胰蛋白酶、双 证明，紫外照射会使皮肤成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白合 抗，Billab公司；磷酸盐缓冲液（PBS ），北京中杉金桥有 成减少[2-4] ，并产生化学或代谢来源的活性氧簇，导致细胞的 限公司；二甲基亚砜（DMSO ），Sigma公司；人I型胶原蛋 氧化损伤[5] 。胶原肽具有良好的生物亲和性与保湿作用，已 白、Ⅲ型胶原和透明质酸ELISA检测试剂盒，美国Peprothch 被证实具有良好的保湿、组织修复和保持皮肤弹性等功能， 公司；细胞内抗氧化酶系超氧化物歧化酶（SOD ）、过氧化 其在滋养肌肤、延缓衰老等护肤品研制方面具有较好的应用 氢酶（CAT ）、总谷胱甘肽GSH-Px 、丙二醛MDA和试剂盒， 开发前景[6-8] 。目前对胶原肽的研究主要集中在保湿、抗氧化 南京建成生物科技有限公司。 等方面，对不同来源胶原肽修复光老化细胞比较研究的报道 Agilent 1260 高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；UV- 相对较少。笔者以分子量小于1 kDa的鳕鱼皮、海蜇及牛骨 2010PC紫外分光光度计，尤尼克（上海）仪器有限公司； 胶原肽为研究对象，比较研究3种不同来源胶原肽对光老化 HF90型二氧化碳培养箱，上海智城分析仪器有限公司； 细胞增殖活性、胞外基质和胞内抗氧化酶活力的影响。 Olympus倒置显微镜，日本Olympus株式会社。 1.2 实验方法 1 实验部分 1.2.1 胶原肽的制备及检测 1.1 试剂与仪器 胶原蛋白酶解条件：50 ℃，pH ＝9.0，6 000 U/g碱性蛋白 鳕鱼皮胶原、牛骨胶原、海蜇胶原，山东烟台新时 酶+6 000 U/g胰酶酶解3 h，将分子量小于1 kDa的各酶解产物经 收稿日期：2017-01-16 作者简介：邵  茜（1983-），工程师，女，山东人。 26