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链霉亲和素商品化应用简介 一、链霉亲和素性质 链霉亲和素（streptavidin，SA）是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，分子量为65kD。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨酸的含量较大，而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；链霉亲和素是一种稍偏酸性（pH6.0）的蛋白质，并且不带任何糖基。??? ?链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素分子也能结合4个生物素分子，二者亲和常数（K）亦为1015L／mol。在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在N端10～12和Ｃ端19-21间断裂，形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。链霉亲和素的活性单位也是以结合1μg生物素所需的量来表示，１mg链霉亲和素的最高活性可达18U。ELISA中的应用 酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：固相的抗原或抗体，酶标记的抗原或抗体，酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。生物素－亲和素系统在ELISA中的应用有多种形式，用于间接包被可以在固相上先预包被亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合，通过亲和素－生物素反应而使生物素化的抗体或抗。这种包被法增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。阴性对照、空白对照本底低，检测敏感性高用链霉亲和素替代抗体包被微孔，避免了抗体包被微孔时容易发生失活(或不易保存)CTnT检测实验中，双抗体夹心ELISA法最低检测值为7.25μg/L，使用链霉亲和素包被法最低检测值达到1.0μg/L，较双抗体夹心ELISA法灵敏度提高7倍。 用于终反应放大在常规ELISA中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代，然后连接亲和素－酶结合物，以放大反应信号。5％ 的抗体具有功能 ，生物素-链霉亲和素体系中60％ 的抗体具有功能。 实例2：淋球菌抗原测定方法检测灵敏度为0.625 μg/L，相当于3.5×104/ml淋球菌，而同时进行常规ELISA测定时，其灵敏度为1.25 μg/L。ELISA放大检测信号，提高检测灵敏度。 产品实例： 绿色荧光素（FITC）标记Streptavidin蛋白产品说明?荧光素标记抗体（FA）是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病理学及自身抗体的临床免疫中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。荧光素抗体为制备的抗血清，再经过亲和层析纯化的方法制成抗体的IgG成分，并采用直接标记法，将异硫氰酸荧光素共价交联到链霉亲和素分子的氨基基团分子上，经过纯化、蛋白定量、FITC浓度及效价鉴定而制备完成。应用范围：免疫组织及免疫病理中抗原、抗体检查，如：各肿瘤抗原检查，细胞凋亡检测。2.用于细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。3.用于临床自身免疫病的多种自身抗体荧光检查，如：抗核抗体，抗心肌酶抗体.4.白细胞分型抗原的免疫荧光染色。5.用于细菌、病毒、梅毒螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原及抗体检测。主要性能：0.3ml或根据试验需求的各种包装，并提供浓缩液或冻干粉，含有0.01%NaN3防腐剂。链霉亲和素含量在1mg/1ml左右.FITC为Sigma异构体I,约在70-80ug/ml,495nm为最大吸收峰，激发波长 525 nm .工作浓度：用0.01mol/l pH7.4 PBS 作1：20–1：50稀释使用。保存：-20可保存一年，避免反复冻融。???? ②辣根过氧化物酶标记链霉亲和素产品类别 详细说明 产品编号 ? 英文名称 ?Streptavidin/HRP 中文名称 ?辣根过氧化物酶标记链霉亲和素 生产产地 ? 产品类别 ?二抗（标记化合物） 克?隆?号 ? 产品价格 ? 产品标准 ?1mg/ml 产品应用 ?免疫学及分子生物学????? ImmobilizerTM-链霉亲和素酶标板/板条 适用于生物素化生物分子瞬间耦合 链霉亲和素共价粘附在表面上 可以随时使用无需进行封闭步骤 极佳的结合力（例如F96透明20pmol/孔*） 表面流失率低 容易接触到反应位置点 非特异性结合 信噪比高 室温下稳定 试剂消耗率低 白色和黑色的板用于发光或荧光应用上 可以选择384孔板 *实际的结合力可能由于耙分子的大小和位阻特性而改变 ? Nunc ImmobilizerTM 链霉亲和素 目录编号 436014 4360115 436016 436020 436022 规格 F96 F96 F96 F8 C8 LockWellTM 颜色 透明 白色 黑色 透明 透明 总