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作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2009, 35(7): 1253− 1260 /zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2009.01253
叶绿体型转昆虫抗冻蛋白基因烟草的耐寒性
*
王 艳 马 纪 黄 薇 邱立明 叶 锋 张富春
/ , 830046
: pJY01, , MpAFP149
pJY01-MpAFP149, , 4
PCR PCR-Southern , ; RT-PCR
T1
(pCAMBIA1302-MpAFP149)–1 ℃3 d, ,
, T1 3 d ,
T1 39.2% 38.2%, 73.7%
: MpAFP149; ; ;
Cold Tolerance of Transplastomic Tobacco Lines Carrying Insect Antifreeze
Protein
*
WANG Yan, MA Ji , HUANG Wei, QIU Li-Ming, YE Feng, and ZHANG Fu-Chun
Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering / College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi
830046, China
Abstract: The antifreeze protein gene MpAFP149 from desert insect Microdera punctipennis dzungarica was inserted into soy-
bean chloroplast vector pJY01 to construct recombinant chloroplast vector pJY01-MpAFP149 by designing special primers. The
plasmid was then transformed into tobacco by gene gun. Four transplastomic tobacco lines were obtained by spectinomycin
screening. PCR and PCR-Southern analyses showed that the MpAFP149 gene was successfully integrated into the tobacco chloro-
plast genome, but the transgenic plants exhibited low homoplasmy. The result of RT-PCR also validated that MpAFP149 gene was
transcribed at mRNA level. The antifreeze effect of transplastomic to
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