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革兰阴性杆菌耐药性检测进展 华鑫科技有限公司技术部 吕苏成 2005 、09 前言 • 革兰阴杆菌是院内感染的重要病原菌， 在感染中常居首位，由于其具有多重耐 药，而且耐药率高，特别是对第三代头 孢菌素和单环酰胺类等新的广谱菌药耐 药，给临床治疗带来很大困难，为止引 起了国内外学者的高度关注，他们在研 究简便、快速检出方法及其耐药机理和 选择治疗用药等方面取得了很大进展， 并已不少报道。 一、G-b 的耐药机理 • 1.细菌产生ß- 内酰胺酶可水解ß- 内酰胺酶 类抗生素，这是最重要和最常见的耐药 机制。细菌产生氨基糖苷类钝化酶对氨 基糖苷类如庆大酶素耐药，喹诺酮类耐 药是由于DNA旋转酶改变或药物渗透性 改变。 • 2.抗生素的渗透障碍：由于细胞壁障碍或 细胞膜通透性改变抗生素无法进入菌体 内发挥抗菌作用，当细菌外膜微孔蛋白 缺失后抗生素也不能进入菌体。 • 3.外膜存在着药物泵出系统（Tet膜蛋白 介导）使进入菌体内的药物主动泵出导 致菌体内药物浓度降低，如对四环素类 和喹诺酮类耐药等。 • 4.靶位的改变：ß- 内酰胺酶类抗生素通 过与青霉素结合蛋白（PBPs ）结合而抑 制细菌生长，当靶位改变后抗菌药物不 能与其结合而失去作用。对磺胺耐药是 由于细菌改变体内二氢叶酸和合成酶， 与磺胺药的亲和力降低引起的。 • 5.非水解屏障机制：主要是染色体介导的 1型ß- 内酰胺酶细菌如绿脓杆菌，肠杆菌 等对头孢类抗生素耐药并非抗生素的ß- 内酰胺环水解，而是由于非水解屏障的 形成，由于ß- 内酰胺酶类药物与质周空 间诱导产生的ß- 内酰胺酶结合成无生物 活性的复合物而不能进入靶位发挥抗菌 作用。 • 细菌同时具有以上两种以上耐药机制就 产生了对多种抗生素的耐药性。 • 二、新型ß- 内酰胺酶的产生、传播，增 加了G-杆菌的耐药性。 • 1.60年代初期从大肠杆菌中首次发现质粒 介导的tem-1 ß- 内酰胺酶，随后在全球转 播并在许多不同菌株中发现如肠杆菌科， 铜绿假单胞菌等。 • 2.70年代开始，一些新的ß- 内酰胺类抗生素应用 于临床，试图来治疗一些革兰阴性杆菌引起的感 染，因为这些细菌已对同类旧的一代抗生素产生 了耐药性。这些新的药物包括第二、三代的头孢 抗生素，如头孢呋新（cefuroxime ）、头孢孟多 （cefamandole ）、头孢噻肟（cefofaxime ）、和 头孢他啶（ceftazidime ），以及单酰胺菌素胺曲 南。在新的ß- 内酰胺类抗生素广泛使用后，出现 了耐授这些新药的肺炎克雷伯菌。由这些异常耐 药菌株所造成的感染也随之出现。 • 这种耐药性也播散到大肠埃希菌的某些菌 株，还有少数其它革兰阴性杆菌。对这种 耐药性产生机制的调查结果显示，由旧质 粒介导的TEM和SHVß- 内酰胺中还存在新 型式的酶。旧酶的结构基因编码发生突变， 产生比亲代酶具有更广谱底物的衍生物。 这些具有超广谱作用底物的新的酶包括第 二、三代头孢类抗生素和胺曲南。因此它 们被命名为超广谱ß- 内酰胺酶（ESBLs ）。 • 随着80年代初期发现产ESBL菌株。在80 年代后期由于ß- 内酰胺类抗生素与ß- 内酰胺 酶抑制剂联合应用不断增加，出现了耐 抑制剂ß- 内酰胺酶（Inhibitor-resistantß- Lactamases ），研究发现耐克拉维酸的ß- 内酰胺酶核酸序列是TEM-1或TEM-2 的 变种，称为IRT （Inhibitor resistant TEM ß-Lactamases ）。 • 以后用数字来表示如TEM-30为IRT-2 ， TEM-31为IRT-1 ，TEM-2为IRT-3等