两种方法对透明软骨脱细胞基质材料制备比较研究-第三军医大学学报.DOC

透明软骨材料经脱细胞处理后细胞外基质成分变化的比较 谭洪波1*，段小军1*，杨 柳1，徐永清2，丁 晶2，杨 军2 （400038 重庆第三军医大学西南医院关节外科 [摘要 目的 比较Triton X-100和十二烷基硫酸钠（SDS）试剂对人关节软骨脱细胞处理后细胞外基质成分的变化，筛选适宜的制备。 方法 首先制备人关节软骨微粒，再采用两种不同试剂分别作用于软骨细胞微粒，相同，脱细胞完成后分别进行DNA总氨基酸及总胶原和GAG含量检测，Triton X-100试剂和SDS试剂并与正常软骨组织进行比较分析。 结果Triton X-100组、SDS组和对照组，经脱细胞处理后其葡萄糖胺聚糖GAG含量分别为84.71±3.72）、（122.63±6.05）、（232.78±75.33）μg/mg，羟脯氨酸含量分别为24.92±1.74）、（24.23±1.68）、（24.54±2.99）μg/mg，DNA含量分别为0.242±0.065）、（0.225±0.057）、（5.679±1.873）μg/mg。 结论Triton X-100和SDS两种试剂均能将软骨微粒中软骨细胞成分有效去除，胶原成分保留量在两组中无明显差异；但是应用SDS行脱细胞处理后能保留更多的GAG成分，更有利于维持软骨细胞功能，是较好的材料制备技术。 关键词 组织工程；；基金项目国家自然科学基金()，(CSTC2011BB5042)，解放军昆明总医院院管课题(201303013) * 同等贡献者 [通信作者，电话（023）687652，E-mail：@163.com [优先出版] /kcms/detail/51.1095.R1558.020.html(2013-06-19) Primary study on the extracellular matrix changes of decellularized articular cartilage treated with different technology Tan Hongbo1, Duan Xiaojun1, Yang Liu1, Xu Yongqin2, Din Jing2, Yang Jun2 (1Center for Joint Surgery, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing, 400038; 2 Orthopaedic Department, Kunming General Hospital, Kunming, 650032, China) [Abstract] Objective To compare the extracellular matrix changes of decellularized articular cartilage treated by TritionX-100 and sodium dodecyl sulfate（SDS）, then choose the suitable preparation. Methods First cartilage particles should be prepared, then use the two reagents to affect the cells of cartilage particles respectively. With the same experimental procedures after decellularization，amino acid and collagen，cartilaginous tissue. Results After treated by decellularization, the glycosaminoglycan (GAG) of Trition X-100 and SDS contain: 84.71±3.72μg/mg and 122.63±6.05μg/mg respectively, compared with that of the normal cartilaginous cell matrix: 232.78±75.33μg/mg..Hydroxyproline contains: 24.92±1.74μg/mg and 24.23±1.68μg/mg respectively after the decellularization, compared the normal data: 24.54±2.99μg/mg. DNA contains 0.242±0.065μg/mg and 0.225±0.057μg/m