志贺菌对hela细胞侵袭力的研究.pdfVIP

中国生物工程杂志 ， ， （）： K?=) JOT’C?=O(OUV ##7 7 E *! W *7 志贺菌对!#$ 细胞侵袭力的研究 ! ! ! 李雪萍 钱雪琴 钱利生 （复旦大学上海医学院病原生物学系微生物室 上海 上海公共卫生中心 上海 ） ! ###$ ###%$ 摘要 通过使用噬斑形成试验、透射电镜及检测志贺菌蛋白表达等方法，研究志贺菌对’() 细 胞的侵袭能力。研究发现： 培养条件下，胞质内出现成堆的志贺菌； 培养条件下，细菌主 $* + $# + 要分布在细胞外。,-,./012 显示，与$# + 培养条件相比，在$* + 培养下，志贺菌表达蛋白质的 种类和数量明显增加。噬斑形成发现， 株福氏志贺菌强毒株，有 株噬斑数 个 ，而 ! 3 4 !### 56( 株弱毒株噬斑数则在 个 以下。透射电镜证实了志贺菌对细胞的黏附、侵入和释放过程。 7# 56( 结果表明：志贺菌对细胞的侵袭能力受温度的影响；不同志贺菌流行株对细胞的侵袭力存在着差 异；实验也显示，应用’8) 细胞研究志贺菌侵袭力是一种简便易行且价廉的方法。 关键词 福氏志贺菌 ’8) 细胞 ,-,./012 噬斑形成 透射电镜 志贺菌是具有高度传染性的肠道致病菌，每年 9? 。将*# +冻存福氏志贺菌## Q 活化，接种至 全世界有 亿病人，年死亡人数为 万， 两管 肉汤，分别置 和 过夜培养。沉淀 !DE7 !!# 33 F 8J $# + $* + 的发病人群分布在发展中国家。死亡人数中 岁 上述细菌，分别加不含抗生素的G/HI!E9# 培养液。 7 以下的儿童占E!F 。目前在我国细菌性痢疾是仅 在L-77# 测细菌浓度，并将细菌浓度调整为 D9 P 次于肝炎的第二位传染病，是国内分布最广的腹泻 !#% 58。待培养瓶中’8) 细胞生长为单层细胞，用 ［］ 病! 。因此通过对志贺菌致病机制的研究，以便寻 不含抗生素的G/HI!E9# 培养液洗涤，再依次加入 找更为理想的防治措施。我们尝试应用细胞模型 G/HI!E9# 培养液和志贺菌悬液，分别置 $# + 和 研究志贺菌的侵袭能力，探讨志贺菌不同流行株致 温箱培养 后，弃去细胞培养液，经 $* + $? G/HI!E9# 病力的强弱，并运用 ,-,./012 技术，检测两种温 培养液洗涤后，用细胞刮刀将贴壁细胞刮下，制成 度下志贺菌的蛋白表达，研究温度与志贺菌蛋白表 沉淀细胞悬液，滴在含有小牛血清玻片上，待干燥 ［］