反相液相色谱操作参数最优化及水溶性维生素的分离-上海有机化学.PDF

化学学报 ACTA CHIMICA SINICA 1988, 46 , 881--886 反相液相色谱操作参数最优化及水溶性维生素的分离 戴琼骨朱阴华 葛海霖 〈华东化。工学院化学系，上海〉 用最小二乘浩拟合的多项式作为描述保留值或峰宽与流动相组成间关系的数学模型，以影响水 榕性维生素分离的主要因素(流动相中有机调节剂甲醇的浓度〉作为主变量，分析时间最短为目标， 各最难分离物质对的分离度;;;.1.5 为约束条件，在--定变量范围内对流动相组成进行了优化，并运用 此优化方法选择了维生素。、烟酸、烟酷腊、维生索马、维生素岛和维生素B6 六种水溶性维生索的 最佳分离条件. 高效液相色谱最佳操作条件的选择是HPLC 研究的重要课题. 近年来已有报道E1-73. C8J 1975 年 Morgan (CRF) 概念已被用于 HPLO 的优化 对气相色谱优化提出的色谱响应函数 中.此外，还有用考虑了分离度的色谱优化函数阳和分离度连乘积E创作为优化指标.但这些 指标的共同不足之处是只能反映总体分离情况，而无法照顾个别分离对. 液相色谱操作参数 的优化主要是流动相的优化. .GlajchCJ!]曾提出用重叠分辨图法选择最佳流动相组成;许多人 用窗口图形法优化流动相参数C1.4-6] 这些方法考虑了各个组分的分离，但并未对分析时间提 出要求.也有人利用流动相组成与保留值的经验公式导出目标函数口气以分离因子作为约束 条件对流动相组成进行了优化，这种模型虽考虑了分析时间，但较难处理在不同流动相组成下 出峰次序颠倒的情况. 本文用多项式作为描述流动相组成与保留值及峰宽的数学模型，将多变量问题简化为单 变量问题.根据初步实验数据，用最小二乘法拟合曲线，并用 F检验判别所得曲线的显著性， 以确定最合适的多项式次数与系数. 在选定的范围内以分析时间作为目标函数，各最难分离 物质对的分离度为约束条件，对流动相组成进行了优化处理，以得到满足一定分离度要求且分 析时间最短的最佳流动相组成. 反相色谱法分离水溶性维生素的报道很多出-13] 但有些流动相盐浓度过高，有些分析时 间过长，且均未考虑流动相的优化.本文采用磷酸盐缓冲液和甲酶作流动相，分析了维生素 。(V )、烟酸、烟酷胶、维生素 B (V队)二维生素 B:a (V .) 和维生索马(V .) 六种水溶性维生素， B 1 B o 并用上述优化方法对流动相进行了优化. 理论 琉动相组成与保留值及峰宽的数学模型 反相液相色谱中流动相组成与溶质保留值之间 的关系比较复杂，从理论上求精确的数学表达式比较困难.但从数学分析角度看，各种变盐之 间的关系虽然表面上形式不同p 最终都可以用一个多项式近似口41. 因此，同样可用多项式近 似表示保留值或峰宽与流动相组成的关系: y=β。+βρ+β:ax.2十… +βp~P (1) 由于在实际过程中有偏差存在，因此y 值的变化带有随机性，这样由实验数据得到的样本 1986 年12 月 1 日收到.现在南京化工学院应用化学系. .882. 化学学报 A0TA CHIMICA SINICA 1988、 p 回归系数 b ， b ,…, b ， 可以作为理论系数β0， β1，…， βp 的估计值，故回归方程为 o 1 6目bo+b1x十b.2X2+ ••• + bpxP (2) y 这里 为