大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞体外自然退变模型的建立-Journalof.PDF

中西医 结合 学报 2 0 06 年 5 月 第 4 卷 第 3 期 Jou r n al o f C hi ne se In t egr a tiv e M edicin e , M ay 2 0 06 , V o l .4 , N o .3 ·2 93 · 大 鼠椎 间盘 软 骨 终 板 软 骨 细 胞 体 外 自然 退 变 模 型 的建 立 石继祥 , 王拥军, 施 杞 , 周 泉, 孙 鹏 , 卞 琴, 周重建 ( 上海 中医药大学龙华医院, 上海 中医药大学脊柱病研究所 , 上海 2 00032 ) [摘要] 目的: 建立大 鼠椎 间盘软骨终板软骨细胞体外 自然退变模型, 为椎 间盘退变 的机制研 究提供载体。 方法 : 酶消化及 自然传代法分离培养大 鼠椎 间盘软骨终板软骨细胞, 观察其形态学变化。采用 M T T 法测定 第Ⅲ代软骨细胞的生长 曲线。采用免疫细胞化学法检测其特征性 Ⅱ型胶原的表达情况, 对该模型进行鉴定。 结果 : 大 鼠椎 间盘软骨终板软骨细胞表达特征性 Ⅱ型胶原。第Ⅲ 代细胞培养在 生长第 13 天后, 细胞分裂 能 力明显下降, 核仁不清, 细胞变形明显, 以梭形为主, 折、旋 光性弱, 细胞 间隙变大, 轮廓增 强, 胞浆 内可见 空 泡、脂滴; Ⅱ型胶原合成明显下降, 细胞增殖率显著降低; 呈现 自然退变过程。结论 : 建立椎 间盘软骨终板软 骨细胞体外 自然退变模型, 为椎 间盘退变机制研究提供较好的细胞学基础。 [ 关键词] 椎 间盘; 软骨终板软骨细胞; 退行性变; 动物模型 [ 中图分类号] R 556 .7 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号] 1672- 1977 (2 006) 03-02 93-05 An in v it ro natural degenerat ion model of chondrocy tes der ived f rom end- plate of interver tebral discs of rat s Ji-Xiang SHI, Yong-Jun WANG, Q i SHI, Quan ZHOU, Peng SUN, Qin BIAN, Chong-J ian ZHOU (In stitute of Spinal Diseases , Longhua Hospital , Shanghai Univer sity of Traditional Chinese M edicine , Shan ghai 200032 , China) ABSTRACT Obj ective: To set up a natural degeneration model of chondrocytes derived from endplate of in- t ervertebral discs of rats in order to offer an appropriate carrier for the study on mechanism of intervertebral disc degenerat ion . Methods : The method of enzyme digestion combined w ith natural subculture was used to set up the in v it ro natural degeneration model of chondrocytes derived from the endplate of intervertebral disc of rats . The morphological appearances and microst ructures of the chondrocyt es of different generations were observed . The ex press ion of collagen Ⅱ in chondrocytes was detected by immunocytochemical method . Results : The chondrocyt es derived from the endplate of int ervertebral disc expressed collag