第二节 疾病治疗中生物科学.ppt

（1）来自基因组中有关的基因本身，称为基因组探针； （2）从相应的基因转录获得的mRNA，再通过逆转录得到的探 针，称为cDNA探针。 （3）在体外人工合成的碱基数不多的与相应基因序列互补的DNA片段，称为寡核苷酸探针（ASO探针）。 探针的标记： 为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交，有必要对探针加以标记，以便在结合部位获得可识别的信号，通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。 归纳： 第一章生物科学与健康 一、合理使用抗生素 抗生素一般是指由细菌、霉菌或其它微生物在繁殖过程中产生的，能够杀灭或抑制其它微生物的一类物质及其衍生物，用于治疗敏感微生物（常为细菌或真菌）所致的感染。 2、抗生素的诞生及发展史 一九二八年，弗莱明（Alexander Fleming, 1881-1955）在英国伦敦圣玛丽医院任职时，无意中在一个被污染的培养皿中发现，原本打算培养的葡萄球菌，它的生长现象竟被一种青绿色的霉菌（青霉菌，学名：Penicillium notatum）所抑制，因此弗莱明推测，青霉菌的分泌物应该具有抑制细菌生长的功效。由于这种抑菌物质是青霉菌的分泌物，因此弗莱明将其命名为青霉素（Penicillin），并于一九二九年，将其观察到的现象首度发表在《英国实验病理学期刊》，但当时并没人理会这个医学史上的重大发现。 抗生素的诞生及发展史 由于当时弗莱明并无法将青霉素纯化出来，因此他只能以含有微量青霉素的粗培养液进行实验，虽然这些粗培养液能够有效杀死试管中的细菌，但当喂食给被细菌感染的兔子或老鼠时，却发现无抑菌的能力。这样的实验结果，使得弗莱明认为青霉素在动物体内无法继续维持其杀菌的效力，因此在发表几篇论文后，就终止了这个研究，使得抗生素的发展停顿了将近十年之久。 抗生素的诞生及发展史 一九四○年，弗洛理与钱恩首度从青霉菌的粗培养液中纯化出青霉素，并用「老鼠保护试验法」进行动物实验。首先，他们将致死剂量的细菌注入八只老鼠的体内，其中四只再追加那些初步纯化出来的青霉素，结果发现只有那些注射过青霉素的老鼠存活下来。一九四一年，青霉素首度进行人体试验，并证实它能有效治疗经由细菌感染的症状。同年，弗洛理到美国商谈青霉素的量产方法，再加上第二次世界大战的催生，因此在一九四三年，青霉素得以顺利量产与应用。 抗生素的诞生及发展史 1945年，弗莱明、弗洛理与钱恩三人，更因发现、纯化与量产青霉素而获颁诺贝尔生理医学奖。 抗生素的诞生及发展史 1944年，瓦克斯曼（Selman Abraham Waksman, 1888-1973）在灰色链霉菌中发现链霉素（streptomycin），由于链霉素是当时第一个能够有效治疗肺结核的药物，瓦克斯曼因而获颁一1952年的诺贝尔生理医学奖。 他的成功，再一次引起全世界科学家对利用微生物生产抗生素的研究热潮。 抗生素的诞生及发展史 人们找到6000多种抗生素 广泛应用的抗生素大约200种 全世界每年抗生素产量超过1.0X108kg 产值约100亿美元 3、抗生素的分类 抗生素的作用机制 抗生素的不良反应 副作用如恶心和呕吐 毒性反应如肝、肾及其它器官损害 后遗反应如链霉素引起永久性耳聋 过敏反应如青霉素引起过敏性休克 药物相互作用引起不良反应 二重感染（病菌抗药性产生）*** 合理使用抗生素 严格掌握适应症 发热原因不明者不宜采用抗生素 病毒性疾病不宜采用抗生素 使用前做药敏试验 新生儿、老年人、肝肾功能不全者慎用毒性大的抗生素 严加控制预防性应用抗生素 应尽量避免在皮肤、黏膜等局部使用抗生素，易导致过敏反应。 探针的来源有3种： １、构建基因探针：利用已知致病基因的核酸序列 基因诊断的一般程序 ２、获取待测组织单链ＤＮＡ，进行ＰＣＲ扩增， 热处理后得到大量的单链ＤＮＡ ３、将单链ＤＮＡ转到尼龙膜上，观察基因探 针和它能否进行杂交 结果：有杂交ＤＮＡ分子的说明待测组织中有 已知该致病基因的核酸序列 ASO探针法优点：灵敏度高、特异性强、 费用低。 缺点：一次只能检测一种基因。 4、基因芯片 基因芯片概念：基因芯片，也叫DNA芯片，是将大量特定序列的DNA片段（分子探针）有序地固定在经过处理后的尼龙膜、玻璃片、硅片等支持物上 ，从而能快速、准确地对大量DNA分子序列进行测定和分析的一种类似电脑的芯片。 原理：利用碱基的互补配对原则 （DNA分子杂交） 材料：分子探针，尼龙膜，玻璃片，硅片 基因芯片 制作基因芯片的大致步骤： 确定突变的基因──制作探针──将大量探针有序地固定在硅片等上。 基因芯片 诊断特点: