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实验五 SDS-PAGE1.ppt

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实验五 SDS-PAGE1

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子量 ;一. 实验目的; 二 .实验原理;二. 实验原理;二. 实验原理;二. 实验原理;二. 实验原理;二. 实验原理;三. 实验试剂和器材;2.实验试剂;(7)10%过硫酸铵(AP) (8)TEMED(四甲基乙二胺) (9)样品溶解液:SDS(100mg)+巯基乙醇(0.1ml)+ 溴酚蓝(2mg)+甘油(2g) +0.05mol/L pH8.0Tris- HCl(2ml),最后定容至10ml。 (10)固定液:取50%甲醇454ml,冰乙酸46ml混匀。 (11)染色液:称取考马斯亮蓝R250 0.125g,加上述固定液 250ml, 过滤后备用。 (12)脱色液:冰乙酸75ml,甲醇50ml,加蒸馏水定容至1000ml。 (13)电极缓冲液(内含0.1%SDS,0.05mol/LTris- 0.384mol/L甘氨酸缓冲液pH8.3):称Tris6.0g,甘 氨酸28.8g,加入SDS1g,加蒸馏水使其溶解后定容至1000ml。 ;3. 实验器材;各部分凝胶配制;四. 实验过??;四. 实验过程;四. 实验过程;四. 实验过程;五.分析计算;六.思考题

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