医药、农药分析5.6.ppt

* 由于每种化合物都有其独特的红外吸收光谱，尤其在1300~650区间出现相当复杂的吸收峰，每一个有机药品在该区内的吸收峰位置、强度和形状都不一样，如同人的指纹，作为药物鉴定的依据，准确度极高。因此，红外光谱法已成为各国药典共同采用的方法。 四、药物成分的定性鉴定 红外光谱法用于药物鉴定，通常采用的是标准对照法。 具体做法：将经分离、纯化了的药物组分绘制红外光谱图，进行谱图解析和查找标准谱图，若与标准谱图完全一致(两者采用的条件必须一致)，则表明二者为同一药品。据此可确定该组分的化学结构。否则，还需借助UV、NMR、MS等其他手段测得的数据，经综合分析方可定出未知组分的化学结构。 3. 红外光谱法 四、药物成分的定性鉴定 当两个测试样品在相同条件下测得的光谱图完全一致，就可以确定它们是同一物质。但当两个谱图不相同时，需非常慎重，不能武断地认为不是同一物质。因为同质异晶体或同一药物因来源不同均有可能导致谱图不同。如天然的秦皮乙素二甲醚与人工合成的产品，所有物理数据完全相同，但红外光谱却有明显的差异。 四、药物成分的定性鉴定 某些药物的化学结构比较复杂，缺少特殊反应的官能团或由于化学结构相互差异甚微，用颜色反应.生成沉淀，衍生物制备或其他经典的鉴别手段已不足以互相区分时，红外光谱的应用往往能够起到极其显著的鉴别效果。鉴于此我国药典中法定的鉴别方法已逐渐用红外光谱法作为土要的鉴别手段，很多国家均采用红外光谱法作为药品的重要鉴别手段。 四、药物成分的定性鉴定 一般固体样品KBr或KCl压片法是最常用的方法，其次是糊法，然后是膜法。膜法可将样品溶液涂布在盐片上，使溶剂挥发后成膜，或将样品置两块盐片中热溶成膜；液体样品如沸点低、挥发性大，则只适于装在密封池中测定；黏度中等、透明度好而不吸湿的液体可在可拆吸收他中测定；黏稠液体可直接涂布在盐片土，溶液则需使溶剂挥发后测定。 药物的红外谱图集有许多种，最常用的是Sadtler标准谱图集 四、药物成分的定性鉴定 ——苦黄注射液中乙酸乙酯萃取物的剖析 苦黄注射液是由国家卫生部批准生产的中药复方静脉注射液，属国家级二类中药新药，处方由大黄、苦参、茵陈、柴胡等中药组成。具有清热利湿和疏肝退黄的功能，主治湿热黄痘，临床上适用于因湿热内蕴而引起的病毒性黄疽型肝炎患者的退黄。药理研究表明，其酯溶性成分为其有效活性成分之一。 五、药物分析实例 宗水珍利用薄层分析、测定熔点、红外、质谱、核磁共振等技术，对苦黄注射液中酯溶性部分（乙酸乙酯可溶性部分）进行了剖析，共鉴定出5种晶体，它们分别为大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、咖啡酸和没食子酸，其结果对苦黄注射液的生产提供了一个质量检验依据，同时对鉴定苦黄注射液的真假提供了一种较为有用的手段。 五、药物分析实例 （一）酯溶性部分的提取 取苦黄注射液1L，调pH值至3。用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯可溶性部分，即酯溶性部分; （二） 酯溶性部分的分离与鉴定 将上述所得酯溶性部分用1mol/L的HCl调pH值至5~6，浓缩成浸膏（23g)，进行硅胶柱色谱分离。依次用氯仿、氯仿-乙酸乙酯(99：1——9：1）、氯仿-乙酸乙酯-甲醇（9：l：0.1——9：1：2)洗脱，再通过制备薄层分离得到5种化合物。 五、药物分析实例 （三）酯溶性组分的结构鉴定 通过分离纯化得到以下5种晶体 1、晶体Ⅰ 黄色粒状结晶，经与大黄酚样品对照(硅胶H薄层板，展开剂苯:乙酸乙酯=50：1，Rf =0. 68) ,确证Ⅰ为大黄酚，结构式为 五、药物分析实例 2、晶体Ⅱ 橙黄色粒状结晶，测其红外光谱，如图： 五、药物分析实例 3、晶体Ⅲ 黄色粒状结晶，熔点为284-286℃.测其红外光谱 五、药物分析实例 4、晶体Ⅳ 橙黄色结晶，熔点为202~203℃，测其高分辩质谱 结论：相对分子质量为180.0419，分子式为C9H8O4，不饱和度为6. 五、药物分析实例 经与标准的咖啡酸 1H-NMR谱对照，两者相同，确证晶体为咖啡酸，其结构为 五、药物分析实例 5、晶体Ⅴ 土黄色结晶，熔点为239~240℃，测其红外光谱，如图 五、药物分析实例 经与没食子酸标准样品的红外光谱对照，两者相同，确证晶V为没食子酸，结构式为 （四）结论 经过对苦黄注射液酯溶性部分的分析，共鉴定出5种晶体，它们分别为大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、咖啡酸和没食子酸。从而为苦黄注射滚的生产提供了检验依据，对鉴别苦黄注射液的真假提供了一种手段 五、药物分析实例 1．检验方法 （1）对照法 取一定量待检杂质的对照物配成对照液，另取一定量供试品配成供试品液，在相同条件下处理后，比较反应结果(比色或比浊)，从而判断供试品中所含杂质是否超过限量。 ( 一) 医药杂质的检验 特点：该法的检验结果，只能判定医药所含杂质是否符合限量规定，一般不