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1%鸡红细胞制备方法
1%鸡红细胞是进行 HA-HI(血凝-血凝抑制)试验的必备材料之一,而 HA-HI 试验是动物医学专业必须掌握的专业技能操作。那么,该如何制备呢?恰巧近日刚刚操作了此项试验,现与大家分享。:.新鲜抗凝血,100ml 青瓶,15ml 离心管,PBS缓冲液等:.着红色的,看上去印还非常新鲜。我努力镇定,首先想到,莫不是 准备好试验所需的所有材料,包括离心管、低速离心机、试管架、PBS 缓冲液(生理盐水)、注射器、100ml 大青瓶及塞子等等。 抗凝血第一次离心。用注射器采集若干毫升抗凝鸡(鸭)血,根据需要确定。将抗凝血缓慢注入离心管内,盖好盖子后将离心管放入离心机,配平后 1500r/min 离心 5min,离出抗凝剂及血浆着红色的,看上去印还非常新鲜。我努力镇定,首先想到,莫不是等。 第一次离心结束后,将上层液体及白细胞层用注射器吸出,加入适量 PBS 缓冲液,配平后进行第二次离心,1500r/min 离心 5min,进一步清洗红细胞。第二次离心结束后,同样吸出上层液体及白着红色的,看上去印还非常新鲜。我努力镇定,首先想到,莫不是细胞层,再加入适量 PBS 缓冲液,配平后进行第三次离心,2000r/min 离心 10min,进一步清洗红细胞。离心结束,最后一次吸出上层清液。量取99mlPBS缓冲液加入100ml大青瓶(或其他容器),用注射器(或其他,如吸管)吸取 1ml 洗净的红细胞,缓慢加入 99mlPBS 缓冲液中,塞紧瓶塞。着红色的,看上去印还非常新鲜。我努力镇定,首先想到,莫不是1%红细胞制备好后,一般置于 4℃冰箱保存,用时充分混匀即可。2dw0f8c7d 单人操作
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