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第２６卷第 １期 激 光 生 物 学 报 Ｖｏｌ．２６Ｎｏ．１
２０１７年２月 ＡＣＴＡ ＬＡＳＥＲ ＢＩＯＬＯＧＹ ＳＩＮＩＣＡ Ｆｅｂ．２０１７
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７７１４６．２０１７．０１．００４
二次谐波结合双光子荧光成像方法观察
人源胶原蛋白透皮吸收情况
１ １ １ １ ２ ３ ２ １
孙娅楠 ，赵 静 ，李超华 ，刘珏玲 ，李松林 ，陈 辉 ，孙桂荣 ，王 毅
（１．中国中医科学院医学实验中心，北京１００７００；２．天津伊瑞雅生物科技有限公司，天津３００３９９；
３．北京急救中心，北京 １０００３１）
摘 要：
目的：用二次谐波成像结合双光子荧光成像的方法观察人源胶原蛋白透皮吸收的情况。方法：将荧光
标记的人源胶原蛋白（１ｍｇ／ｍＬ）涂抹于小鼠表皮层经皮肤吸收１ｈ后用背向二次谐波观察皮肤内胶原纤维作
为真皮层定位标志，用双光子扫描共聚焦显微镜观察人源胶原蛋白透皮吸收深度，吸收方式。结果：二次谐波
成像结合双光子荧光成像表明人源胶原蛋白透皮吸收１ｈ后可观察到荧光信号沿着毛囊聚集，并有部分荧光分
子由毛囊扩散至真皮层。结论：二次谐波可以更快速，更灵敏地检测皮肤中的胶原纤维，以此作为检测物质透
皮吸收深度的定位标志，具有不受荧光信号干扰的优点。人源胶原蛋白可以沿着毛囊进入真皮层，并从毛囊中
扩散至胶原纤维层从而补充皮肤中的胶原纤维。
关键词：
二次谐波；荧光成像；皮肤；胶原；透皮吸收
中图分类号：
Ｑ５１２
文献标志码：
Ａ
文章编号：
１００７７１４６（２０１７）０１００２４０６
ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＳｅｃｏｎｄＨａｒｍｏｎｉｃＧｅｎｅｒａｔｉｏｎａｎｄＴｗｏｐｈｏｔｏｎ
ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｈｅＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎＴｒａｃｉｎｇｏｆＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
ＬａｂｅｌｌｅｄＣｏｌｌａｇｅｎ
１ １ １ １ ２
ＳＵＮＹａｎａｎ，ＺＨＡＯＪｉｎｇ，ＬＩＣｈａｏｈｕａ，ＬＩＵＪｕｅｌｉｎｇ，ＬＩＳｏｎｇＬｉｎ，
３ ２ １
ＣＨＥＮＨｕｉ，ＳＵＮＧｕｉｒｏｎｇ，ＷＡＮＧＹｉ
（１．ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＴｉａｎｊｉｎＩｒｈｅａｙａＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．Ｔｉａｎｊｉｎ３００３９９，Ｃｈｉｎａ；
３．ＢｅｉｊｉｎｇＥｍｅｒｇｅｎｃｙＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：
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