临床生物化学讲义完整.ppt

临床生物化学讲义（一） 山东省千佛山医院 检验科 张丽 zhangli@ 内容简介 临床生物化学常用的检测方法 肝胆疾病的生物化学检测 肾脏疾病的生物化学检测 血清脂类及脂蛋白生物化学检测 内容简介 糖及其代谢物的生物化学检测 心脏疾病的生物化学检测 无机离子的生物化学检测 化学比色法常见的几种类型 临床生物化学常用的检测方法 化学比色法 免疫比浊法 离子选择性电极电位法 电泳法 化学比色法 基本原理：根据比尔定律，特定波长的光通过溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。待测物经过一定的化学反应生成的产物，对特定波长的光具有吸收峰，从而对物质进行定量检测。这是最常用的一种方法。 举例：总蛋白，白蛋白的测定 免疫比浊法 基本原理：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，浊度亦增加。如检测散射光强度则为散射比浊，如检测透过光则为透射比浊。我们所用为透射比浊 举例：前白蛋白，载脂蛋白等蛋白的测定 离子选择性电极电位法 基本原理：根据能斯特方程，离子选择性电极法通过检测电极表面电位的改变，比较测定电极与参比电极表面电位变化的差值大小来计算样本中离子的含量。 举例：钾、钠、氯的测定 电泳法 基本原理：在直流电场中，带电粒子具有向带相反电极移动的现象。血清中的蛋白质为双性离子，在碱性环境中带负电荷，在电场中向正极移动。不同蛋白具有不同大小、分子量和电荷，带电荷多，分子量小则泳动快，反之则慢，从而将不同蛋白分离。 举例:血清蛋白电泳 思考题 简述临床生物化学常用的几种检测方法，并各举一例。 肝胆疾病的生物化学检测 1.肝脏的生理功能 1.代谢功能：三大物质（糖、蛋白质和脂类）的同化、储存和异化；核酸代谢、维生素的活化和储藏；激素的灭活及排泄；胆红素、胆酸的生成；铁、铜等金属的代谢 2.排泄功能：对胆红素和某些染料的排泄 3.解毒功能：生物转化功能（同化、异化） 4.物质合成功能：凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的灭活清除 2.肝功能实验的内容 蛋白质代谢功能检查 胆红素代谢检查 胆汁酸代谢检查 摄取、排泄功能检查 血清肝酶谱的检查 蛋白质代谢功能检查 肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的功能降低，蛋白质的合成量就减少 ?球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损，间质细胞增生时，球蛋白的生成增加 因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量的改变 其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白的增多等 因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化，可以了解肝脏蛋白质代谢的功能 1.总蛋白、白蛋白的检测 总蛋白：双缩脲法 蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物，在540nm有吸收峰，并与蛋白含量 成正比。 蛋白+ Cu2+→ Cu –蛋白络合物（紫红色） 白蛋白的检测 溴甲酚绿终点法 血清中白蛋白与溴甲酚绿在pH4.2环境中结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，在630nm有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，从而测出白蛋白含量。 白蛋白+BCG白蛋白→溴甲酚绿复合物 与溴甲酚紫法的比较 溴甲酚绿法操作简单、快速，即可手工操作，也能自动化分析，是目前国内最常用方法。 溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较溴甲酚紫法差 溴甲酚紫法测定白蛋白具有高特异性 临床意义 血清总蛋白与白蛋白升高 急性失水、肾上腺皮质功能亢进 血清总蛋白与白蛋白降低 肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌 总蛋白＜60g/L,白蛋白＜25 g/L，低蛋白血症 营养不良：摄入不足 丢失过多：肾病、烧伤、大出血 消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤 血清总蛋白与白蛋白升高 TP＞80g/L（高蛋白血症） G＞35g/L（高球蛋白血症） 慢性肝病、M蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病 血清TP降低 生理性减少（e.g.3y）、免疫功能抑制、先天性低TP A/G倒置 肝功能损伤、M蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多发性骨髓瘤 血清前白蛋白测定 免疫比浊法 标本中PAB与特异性抗体反应形成不溶性复合物，可在340nm测定该复合物的浊度，与同样处理的标准品比较，得出标本中PAB的含量。 临床意义 降低：营养不良、慢性感染、肿瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，对早期肝炎、急性重肝具有特殊诊断价值 升高：Hodgkin病 胆红素代谢检查 胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰老RBC的血红蛋白分解后形成 生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚未与其它化合物结