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免疫组化技术实用篇
免疫组织化学(实用篇)(immunohistochemistry) 临床病理诊断中常用的抗体简介 人体组织细胞分类 上皮细胞:包括鳞状上皮,腺上皮,尿路上皮。 间叶组织:包括脂肪,肌肉,血管,纤维结缔组织,骨和软骨组织,间皮。 神经组织:神经元,胶质细胞,神经纤维。 淋巴造血:淋巴细胞,粒细胞,浆细胞,单核细胞。 内分泌和神经内分泌组织:甲状腺,肾上腺,垂体,胰腺的内分泌腺,各器官的神经内分泌细胞等 其他:黑色素细胞,性腺 常用上皮性标记物 细胞角蛋白(cytokeratin,CK) 上皮膜抗原(epithelial membrane antigen, EMA) 癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA) 其他:villin,Moc-31,MUC(粘蛋白)系列等 Cytokeratin(keratin或CK) 上皮细胞的骨架形成蛋白(中间丝),维持上皮细胞的结构和功能 分为I型和II型(酸性和碱性或中性),编码基因分别位于17q21.2和12q13.13,共54个基因 表达方式与组织类型和细胞分化程度有关,具有高度的特异性 蛋白具有不同的分子量和等电点 细胞中keratin常成对出现(酸性和碱性配对出现) 根据氨基酸序列,将Keratin按分子量和等电点进行二维分类 CK抗体 常用的CK抗体 AE1/AE3:(CK pan) 最常用,胞浆呈细丝状阳性 正常上皮细胞阳性表达,肝细胞阴性。 在其他肿瘤,如小细胞癌,尿路上皮癌,室管膜瘤,胸腺瘤,间皮瘤,上皮样肉瘤,上皮样血管内皮瘤,平滑肌肉瘤,滑膜肉瘤等常呈阳性表达 常用的CK抗体 CK7和CK20: 分子量为54KD,正常乳腺,肺,尿路上皮阳性表达,胃肠道,肝细胞,前列腺阴性表达 主要用于乳腺癌,肺腺癌与胃肠道癌的诊断与鉴别诊断 胰腺癌,胆管癌,卵巢和子宫内膜腺癌,尿路上皮癌阳性表达。卵巢粘液性癌,前列腺癌,肝癌阴性表达 与CK20和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。 常用的CK抗体 CK7和CK20: 分子量46KD,正常胃肠道,尿路上皮,Merkel细胞阳性表达,肝细胞,乳腺,肺阴性表达 主要用于胃肠道腺癌,卵巢粘液性癌,Merkel细胞癌的诊断 鳞癌,甲状腺肿瘤,胸腺瘤阴性表达 胆道和胰管的腺癌,小肠类癌,前列腺和间皮阳性表达 与CK7和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。 常用的CK抗体 CK5/CK6: 分子量为58KD和56KD的角蛋白,存在于鳞状上皮、导管上皮的基底细胞、肌上皮细胞和间皮细胞,腺上皮不表达 用于鳞癌和腺癌别,间皮瘤和腺癌的鉴别 导管上皮良恶性增生的鉴别 常用的CK抗体 34BE12(CKH): 高分子量细胞角蛋白,前列腺基底细胞标记,用于前列腺癌的诊断。 CK19: 40KD的角蛋白,在单层上皮和间皮中表达,在肝细胞不表达,用于鉴别肝细胞癌和胆管细胞癌;甲状腺肿瘤中,甲状腺乳头状癌常阳性表达,良性和其他癌很少表达。 CK14:50KD的角蛋白,在复层上皮表达,是鳞状上皮的主要标记物。 间叶组织的标记物 波形蛋白(vimentin, VIM) 肌组织标记物:Desmin(结蛋白), actin(肌动蛋白), myogenin(肌浆蛋白),MyoD1(肌调节蛋白)等 脉管标记:血管内内皮细胞的标记物:CD34,CD31,淋巴管D2-40 组织细胞的标记物:CD68, CD163,等 间皮细胞的标记物:calretinin,mesothelial等 用于鉴别软组织肿瘤的来源 淋巴造血系统的标记 淋巴造血组织,尤其淋巴细胞在其发育和分化过程中能形成许多分化性抗原,应用这些分化性抗原的特异性单克隆抗体能区分出免疫表型不同的细胞系,而且还能区分出同一细胞系的不同亚型和不同分化阶段的细胞群,因此可以利用此特性来诊断和分类恶性淋巴瘤和白血病。 淋巴造血系统的标记 白细胞共同抗原(leucocyte common antigen,LCA,CD45) 免疫球蛋白(immunoglobulin Ig) 全B细胞标记物:CD20, CD79a, PAX5, Bob1等 全T细胞标记物:CD3, CD43, CD5, CD7,CD2等 T淋巴细胞亚群标记物:CD4,CD8 粒细胞和单核—巨噬细胞相关标记物:MPO, CD34,CD68等 浆细胞标记:CD38,CD138 其他:CD30,TDT,CD15,CD56,ALK,MUM1 神经组织标记物 胶质纤维酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein GFAP) S-lOO蛋白(S—100 Protein) 神经元特异性烯醇酶 (Neuron Specific Enola
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