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全国艾滋病检测技术规范修订版
全国艾滋病检测技术规范(2009年修订版 ) 2009年修订版 与2004年版比较: 本次主要对以下 6 个方面内容进行了修改、增补和完善。 修订版(一) 在样品的采集和处理中,增加了滤纸干血斑样品(DBS)的采集和处理,用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理; 在HIV抗体检测中,增加了免疫荧光法和化学发光法,进一步明确了不同情况下的检测策略; 修订版(二) 在HIV核酸检测中,增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测方法; 根据临床治疗需求,增加了HIV-1的耐药检测; 修订版(三) 进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理,使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求,更加具有可操作性; 考虑到技术发展和新的需求,增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。 修订后的《规范》(一) 共九章 第一章 样品的采集和处理 第二章 HIV抗体检测 第三章 HIV-1抗原检测 第四章 HIV核酸检测 第五章 HIV-1耐药检测 修订后的《规范》共九章 第六章 CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测 第七章 HIV-1的分离培养 第八章 实验室生物安全 第九章 艾滋病检测实验室的质量管理 第一章 样品的采集和处理 样品种类及相应的用途(一) HIV抗体检测的样品包括: 全血、血清、血浆 唾液、尿液 DBS样品 样品种类及相应的用途(二) 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞(PBMC)及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。 PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。 采集和处理样品(一) 血液 滤纸干血斑 尿液和唾液 采集和处理样品(二) 血液:抗凝全血、末梢全血、血浆、血清、淋巴细胞富集液、PBMC 注意:根据检测要求选用适当的抗凝剂,如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。 注意: 所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品,均应视为有潜在传染性,都应以安全的方式进行操作。 样品的保存(一) 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品,短期(1周)内进行检测的可存放于2~8℃, 一周以上应存放于-20℃以下。 样品的保存(二) 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4℃,3个月以内应存放于-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。 样品的保存(三) 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室,筛查阴性样品,可根据具体需要决定保存时间,建议至少保存1~2个月。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。 样品的保存(四) 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样品,无论确证结果如何,均应将剩余的样品保存至少10年,特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。 样品的运送 应符合生物安全要求; 要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送; 应采用三层容器对样品进行包装,随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息,并应放置在第二层和第三层容器之间。 样品运送注意事项(一) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。 用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下(18~25℃)或4℃(特殊要求时)运送。 用于病毒载量检测的样品应在-20℃以下运输。 DBS样品应在室温下(18~25℃)运送。 每一件包装的体积以不超过50mL为宜。 样品运送注意事项(二) 运送样品必须有记录。 特殊情况下经有关部门批准可以用特快专递邮寄样品,但必须按三层包装,将样品管包扎好,严禁使用玻璃容器。 样品的接收(一) 样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实验室内、由经过培训的、穿戴防护衣、戴口罩、防护眼镜的工作人员在生物安全柜中打开,用后的包裹应及时进行消毒。 核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出,对样品管和盛器消毒,同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。 样品的接收(二) 检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受,应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。 接收样品时应填写样品接收单。 第二章 HIV抗体检测 本章规定了HIV抗体的检测方法、程序、结果报告、检测策略及质量控制。 适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血
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