免疫血液学红细胞血小板配血试验.ppt

一、人类白细胞抗原 人类白细胞抗原代表个体特异性 与移植排斥有关的抗原称为组织相容性抗原或移植抗原-MHS 编码MHS的基因组称为主要组织相容性复合物(MHC) 人类的MHC是首先在白细胞上发现的，称为人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，HLA) HLA的研究历史 最早发现人类白细胞抗原者为Dausset-1954年 HLA不仅仅是白细胞特异性同种抗原。 它是分布广泛的组织抗原。 HLA的分型命名 血清学分型命名 具有临床意义的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等位点(Loci)，每个位点又有若干等位基因，这些基因的产物便是HLA抗原。 临床意义比较大的HLA-A、B、C称为Ⅰ类抗原 HLA-DR、DQ、DP称为Ⅱ类抗原。 HLA的遗传 单体型遗传 存在基因重组 多态性现象 连锁不平衡 HLA抗体及抗体检测 临床上HLA抗体多由妊娠、输血或器官移植等免疫产生 HLA在医学中的应用 一、HLA与输血 HLA与非溶血性输血反应 HLA与血小板输注 二、HLA与器官移植 (一)肾移植 (二)骨髓移植 三、HLA与亲子鉴定 二、血小板血型 一类是与其他细胞表面或组织共有的抗原，称血小板相关抗原 另一类为血小板特异性抗原 血小板血型 相关抗原：主要与红细胞的ABO血型系统以及人类白细胞抗原(HLA)有关 特异性抗原：由血小板特有的抗原决定簇组成，表现出血小板独特的遗传多态性，在其他细胞和组织上不能发现 血小板血型 血小板表面存在红细胞ABO系统的A抗原和B抗原,可能是从血浆中吸附上的。 是否还存在其他红细胞血型抗原尚在探讨之中 在我国，通常进行ABO同型血小板输血 配合性血小板输注 ABO同型 血小板抗体的筛选 交叉配合试验：确保供受体的血小板型和HLA型的配合 血小板血型 血小板特异性抗原 具有独特的型特异性，并构成血小板膜结构中的一部分 血小板特异性抗原有6个血型系统24个抗原，正式命名为HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、HPA-5、HPA-15 血小板血型的临床意义 一.血小板输注无效性(PTR) 二.输血后紫癜(PTP) 三.新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP) 四.血小板的自身免疫作用---特发性血小板减少性紫癜(简称ITP) 血小板同种抗体与输血 1.ABO血型的选择 一般需要做主侧或次侧的交叉配血，最好输注ABO血型配合的血小板 2．Rh血型的选择 D阴性的患者，最好要避免用D阳性献血者的浓缩血小板。对育龄妇女可以注射Rh免疫球蛋白 三、输血前免疫血液学检查 目的:供者与患者的血液 输血前免疫血液学检查 内容： 患者的病史、标本的核对及处理 供受双方ABO、Rh血型鉴定 不规则抗体的筛选和鉴定 交叉配血试验 报告和发血 标 本 一、标本采集 二、红细胞悬液的配制 三、标本的保存 标 本 一、标本采集 1．红细胞标本-ACD或CPD、(Na2-EDTA)抗凝静脉血 少数患者有一种自身抗体--不宜用抗凝血液作为红细胞抗原标本 2．血清标本 一般实验避免使用血浆 配血试验用血清——不超过72小时 二、红细胞悬液的配制 1、红细胞悬液常用浓度有2％、5％和10％ 2、2％的悬液一般用于滴定抗体效价，5％的悬液常用于血型鉴定和交叉配血试验，10％的悬液则用于测定抗体的亲合力。 三、标本的保存 1．血清标本 不稀释的血清标本如加有防腐剂可在4℃保存数月,在-20℃以下可保存数年 如用生理盐水稀释的血清只限当天使用 2．红细胞标本 一般试验用的凝血标本要在5天之内使用，以不溶血为准。如用保存液可保存3周 用盐水配制的红细胞悬液只能在当天使用 供受双方ABO、Rh血型鉴定 ABO血型正反定型 Rh血型鉴定 不规则抗体的筛选和鉴定 抗A、抗B以外的所有抗体统称为不规则抗体。 常见于多次输血的人群 不规则抗体的筛选和鉴定 患者血清+试剂筛选红细胞 盐水介质 聚凝胺介质（最为常用） 抗人球蛋白介质（最为常用敏感） 酶介质法 交叉配血试验 受者血清+供者红细胞 受者红细胞+供者血清 方法 红细胞抗原抗体反应过程 抗原抗体的靠近： 红细胞抗原位点带负电荷，抗体Fab端带正电（Kell系统