反相高效液相色谱法测定黄芩苷固体分散体中黄芩苷含量.docVIP

反相高效液相色谱法测定黄芩苷固体分散体中黄芩苷含量 　　[摘要] 目的 建立反相高效液相色谱法测定黄芩苷固体分散体中黄芩苷含量的测定方法。 方法 采用Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.1%磷酸溶液（55∶45）为流动相，柱温为30℃，流速为1.0 ml/min，检测波长280 nm，进样量为10 μl。 结果 黄芩苷浓度在29.0～174.0 μg/ml的范围内与峰面积呈良好的线性关系，线性方程为A=21.809C-17.243（r=1.0000，n=7）；黄芩苷的平均回收率为100.9%，RSD值为1.18%。该方法的精密度、重复性良好，RSD值均小于2.00%。 结论 该方法简便、快捷、准确度高，能有效控制黄芩苷固体分散体胶囊中黄芩苷的质量。 [关键词] 黄芩苷固体分散体；高效液相色谱法；含量测定 [中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（a）-0062-03 黄芩苷（Bacialin，分子式：C21H18O11）是从唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis georgi）根部提取分离出来的一种黄酮类化合物。黄芩苷具有广谱抗菌、抗病毒和解热作用[1]，能明显减轻肝细胞变性和坏死，对抗结核药物致肝细胞损伤具有保护作用[2]，对四氯化碳诱发的急性肝损伤小鼠有保护作用[3]。此外，黄芩苷以抑制兴奋性氨基酸毒性、抗自由基的毒性损伤、干预细胞内钙超载等多种机制对缺血性脑损伤有明显保护作用[4]。多项药理学研究表明，黄芩苷还具有抗炎、抗细胞凋亡、抗氧化、降压、镇静、调节免疫功能，抗心律失常、抑制脂加氧酶而对人类哮喘有效等作用[5-7]，临床上用于感染、肺炎、肝炎、高血压和先兆流产等疾病[8]。本试验以泊洛沙姆188为载体，采用熔融法制备黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体，所建立的反相高效液相色谱法能准确、快速测定黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体的含量，选择性好，准确度高，可用于控制黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体的质量，对于建立质量标准有重大意义。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent 1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦）；AB265-S型电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多）；AS20500A超声波清洗器（天津奥特赛仪器有限公司）；UV-2450紫外可见分光光度计（日本岛津）。 1.2 试药 磷酸（天津市广成化学试剂有限公司，批号：201201041，分析纯）；甲醇（广州化学试剂厂，批号2，分析纯）；甲醇（瑞典欧森巴克化学公司，批号：4020-3，色谱纯）；水为超纯水。黄芩苷固体分散体（自制样品，批号：130101、121229、130108，规格：10 mg/粒）；黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号：110715-200413）。 2 方法与结果 2.1 检测波长的选择 精密称取适量黄芩苷对照品，用甲醇溶解，制成浓度为60 μg/ml的溶液，以相应溶剂为空白对照，在200～400 nm波长范围内进行扫描。结果提示，黄芩苷在280、210 nm处有最大吸收（图1）。由于在210 nm处有末端吸收，故选择280 nm作为黄芩苷固体分散体的检测波长。 2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（55∶45）；柱温：30℃；流速为1.0 ml/min；检测波长：280 nm；进样量：10 μl。理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2000。 2.3 溶液的制备 2.3.1 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品约7.5 mg，精密称定，置25 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；精密量取2.0 ml对照品储备液于10 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得到每毫升溶液约含黄芩苷60 μg的对照品溶液。 2.3.2 供试品溶液的制备 取黄芩苷固体分散体胶囊10粒，倒出内容物，研细，混匀，取内容物适量（约相当于黄芩苷3 mg），精密称定，置于50 ml量瓶中，加入甲醇适量，超声10 min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 2.3.3 空白辅料溶液的制备 取处方比例的辅料，置于50 ml量瓶中，用甲醇溶解，超声10 min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，得到空白辅料溶液。 2.4 专属性试验 精密量取“2.3.1”、“2.3.2”、“2.3.3