HeslmRNA在神经干细胞向神经细胞分化过程中表达变化的研究.pdfVIP

4048 重庆医学2013年 11月第 42卷第 33期 · 基础研究 · HeslmRNA在神经干细胞 向神经细胞分化过程中表达变化的研究 白瑞樱 ，卢 娜 (新乡医学院生理学与神经生物学教研室，河南新乡453003) 摘 要：目的 探讨HeslmRNA在神经干细胞 (NSC)向神经细胞分化过程中的表达变化。方法 构建乳鼠海马 NSC的细 胞培养模型，对NSC增殖分化进行形态学观察。细胞分化前后，采用免疫化学染色法分别检测巢蛋 白(Nestin)和神经元特异性 烯醇化酶(NSE)的表达，以鉴定细胞类型。流式细胞仪检测细胞周期以确定细胞增殖活性 。用逆转录一PCR(RT—PCR)检测 NSC 中Has1mRNA 的表达变化情况。结果 从海马分离培养的细胞生长状态 良好，有克隆增殖能力，呈Nestin表达阳性，细胞分化 后呈 NSE表达 阳性 。流式细胞仪检测结果显示 ，诱导前 NSC增殖活跃 ，其 S期 的细胞 比例 明显高于诱导分化各阶段 的细胞 比例 (P0．01)。与诱导前 NSC相比，分化细胞各阶段 G。G 期细胞 比例则显著增多(P0．01)，细胞停滞于GoG1期 。RT—PCR结果 表明，HeslmRNA在 NSC诱导分化前后均有表达，与诱导前相 比，分化后的各阶段 HeslmRNA表达量均明显减少(P0．05)， 而分化各阶段 HeslmRNA表达量差异无统计学意义 (P0．05)。结论 HeslmRNA 的高表达可能与NSC的增殖有关，而 HeslmRNA表达 的减弱则有利于神经细胞的大量分化 。 关键词 ：海马；Hesl；神经分化；神经干细胞 ；逆转录一聚合酶链反应 doi：10．3969／j．issn．167卜8348．2013．33．029 文献标识码 ：A 文章编号：167l一8348(2013)33—4048—03 StudyonexpressionofHes1mRNA duringthedifferentiation ofneuralstem cellstowardneurons BaiRuiying．LNn (DepartmentofPhysiologyandNeurobiology，XinxiangMedicalUniversity，Xinxiang，Henan453003，China) Abstract：0bjective ToexploretheexpressionofHeM mRNA duringneuralstem cells(NSC)differentiationtowardneurons． Methods ToestablishthemodelofcultivationNSC inthehippoeampalofnewborn(24h)SD rats，andthentoobservethemor— phologyofNSC inthecourseofproliferationanddifferentiation．Beforeandaftercellularinduction，theexpressionofNestinand NSE wererespectivelymeasuredtodetectcelltypesbyimmunochemistrymethod．Andflow cytometrywasusedtodeterminecell cyclephases，soastodetectproliferativeactivityofthesecells．M eanwhile，theexpressionofHeslmRNA inNSC wasdetermined byreversetranscription-PCR(RT-PCR)．Results TheresultsdemonstratedthatNSCisolatedfrom hippocampalshowedvigorously clonalproliferationinvitro。andpositiveNestinexpression．Inaddition。thedifferentiatedcellsdemonstratedp