HPLC—TOF／MS测定茶籽粕中的茶皂素主要成分.pdf

2013年 12月 中国粮油学报 V01．28．No．12 第28卷第 12期 JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociation Dec．2Ol3 HPLC—TOF／MS测定茶籽粕中的茶皂素主要成分 尹丽茸 张建华 宋光艳 阿拉西 ·斯尔克米德克 郭梦琦。 钟耀广 (上海海洋大学食品学院 ，上海 201306) (上海交通大学农业与生物学院 ，上海 200240) 摘 要 利用高效液相色谱 一电喷雾一飞行时间质谱(HPLC—ESI—TOF／MS)在负离子模式下成功检测 了荼籽粕中提取的茶皂素。高效液相色谱分析茶皂素超纯品得到5个主要皂苷峰，出峰时间分别为4．01、 19．52、27．74、29．23和34．01rain，各吸收峰峰形对称，由此可见茶皂素组分在该条件下能够得到较好分离。 不同浓度荼皂素的定量曲线表明5个峰的峰面积与茶皂素含量的线性回归方程相关系数r值均在0．99以上。 ESI—TOF／MS质谱分析结果表明5个组分分别含有2—5种五环三萜类皂苷，合计 18种。该法有较高的精确 性，可用于茶皂素的定性、定量分析。 关键词 茶皂素 高效液相色谱 电喷雾一四级杆 一飞行时间串联质谱 中图分类号：TS229 文献标识码 ：A 文章编号：1003—0174(2013)l2—0097—05 根据 《全国油茶产业发展规划》，到2020年 ，我 出几个峰，但各色谱峰出峰时问比较集中，保留时间 国茶油产量将达到 250多万吨，产生的茶籽粕达 短，分离度低 ，不利于后续茶皂素构效关系等方 800多万吨。茶籽粕 中含有 10％～20％的茶皂素 ， 面的研究。 茶皂素是一种五环三萜类化合物，其具有亲水糖链 本试验采用HPLC—TOF／MS方法对茶籽粕中的 及疏水齐墩果烷型五环三萜皂苷元，因此是一种性 茶皂素进行了分离，得到5个组分，且各组分峰峰形 能极佳的表面活性剂。茶皂素具有乳化、起泡、分 对称，保留时间恰当。TOF／MS的分析结果表明5个 散、润湿等性能，可作为化妆品、洗涤剂的原料；同 组分都属于五环三萜类皂素。 时，茶皂素还具有溶血、消炎、降血脂、止咳化痰等生 物活性…。Toshiyuki等 研究发现某些特定结构的 l 材料与方法 茶皂素对 胃黏膜损伤具有有效的保护效应，并且对 1．1 试验材料 胰脂酶有抑制作用；YokeMatsui等 发现茶皂素有 茶籽粕：福建天生农业股份有限公司；茶皂素超 降低血脂胆固醇的作用；Guo等 认为茶皂素对瘤 胃 纯品(t98％)：湖南今汉生物医药技术有限公司。 微生物的群落结构、mcrA基因的表达以及 甲烷的生 1．2 试验试剂与仪器 成有影响。 甲醇(色谱纯)：美国西格玛试剂公司；三氟乙 然而，茶皂素组分的种类很多，且结构相似，因 酸，无水 乙醇：上海国药试剂有限公司。 而对茶皂素不同组分的分离极为困难。 目前针对茶 Waters600高效液相色谱系统：美 国沃特世公 皂素组分的分离方法主要有柱层析 J、薄层层析 j、 司；C18分析柱 (InertsiL／WondasilODS一34．6mm× 高效液相色谱分离 -lo3等。柱层析耗时长，溶剂消 250mm，5txm)：美国菲罗门公司；XevoG2Q—TOF 耗量大；薄层层析对结构相似的组分达不到很好的 massspectrometer，(MilliporeCorp．，Billerica，MA)：美 分离效果；高效液相色谱法具有速度快，灵敏度高等 国沃特世公司；0．22 m微孔滤膜 SCBB一211：上海 优点，已成为常用的皂素分离方法。但 目前报道的 安谱科学仪器有限公司；超纯水纯化系统 MLLI—Q： 茶皂素HPLC分离结果均不理想，有的文献报道只分