HPLC测定银黄颗粒中绿原酸和黄芩苷的含量.pdf

第 34卷 第 12期 家畜生态学报 Vo1．34No．12 2013年 12月 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Dec．2O13 HPLC测定银黄颗粒中绿原酸和黄芩苷的含量 马 力 ，杨丽梅 ，徐倩倩 ，郭时金 ，沈志强 ，柳增善 (1．吉林大学 畜牧兽医学院，吉林 长春 130062；2．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600) [摘 要] 为准确测定银黄颗粒制剂 中绿原酸和黄芩苷的含量，建立 了一套运用HPLC进行 绿原酸和黄芩苷含量测定的简便 方法。色谱 柱，十八烷基硅烷基键合硅胶 柱 (4．6mm×250 mm；5 m)；绿原酸检测波长为 327nm；流动相 ，乙腈一0．4 磷酸溶液 (10：90)；黄芩苷检测 波长为274nm；流动相 ，甲醇一水一0．296／磷酸 (5O：50：0．2)，并对该方法进行 了方法学考证 。 结果表明，此方法具有样品处理简便、色谱分离度和重现性好的特点，可用于银黄颗粒制剂 中 绿原酸和黄芩苷含量的准确测定 ，以实现对银黄颗粒产品的质量控制。 [关键词] 银黄颗粒剂；绿原酸；黄芩苷 ；高效液相色谱法；含量测定 [中图分类号] $811．6 [文献标识码] A [文章编号] 1005—5228(2013)012—0041—04 银黄制剂是指 由金银花提取物和黄芩提取物制 站)；千万分之一电子天平 (梅特勒)；SB3200型超声 备而成的中药制剂 ，主要有银黄 口服液、银黄注射液 波清洗器 (上海新芝生物技术研究所)；Millipore超 和银黄颗粒剂 ；兽用银黄制剂主要有银黄 口服液和 纯水系统 。乙腈、甲醇 (色谱纯，天津市科密欧化学 银黄注射液。银黄颗粒系根据其 口服液改型而成 ， 试剂有限公司)、磷酸 (分析纯 ，烟台市双双化工厂)。 是 由绿原酸和黄芩提取物制成的复方制剂 ，具有清 绿原酸对照品(购 自中国药品生物制品检定所，批号 热疏风 ，利咽解毒 ，抗菌消炎之功效L1]，兽医临床上 为 110753—201117，含量为 96．6O ，用于含量检 主要用于治疗和预防鸡传染性喉气管炎、传染性支 测)、黄芩苷对照品(购 自中国药品生物制品检定所 ， 气管炎所致的肺热咳喘等疾病 ，是 目前用于预 防禽 批号为 110715—201105，含量为 94．O0 ，用于含量 流感 的六大药物之一 ，临床上被广泛应用。为严格 测定)、银黄颗粒制剂 (本公司实验室 自制)。 控制产品质量 ，保证药物预防和治疗疾病 的效果 ，本 1．2 试验方法 研究建立 了一套运用高效液相色谱法 (HighPer— 1．2．1 色谱条件与系统试用性试验 色谱柱 ：十八 formanceLiquidChromatographg，HPLC)法 测 定 烷基硅烷基键合硅胶柱 4．6mm×250mm；流动相 ： 银黄颗粒 中的有效成分绿原酸、黄芩苷含量的测定 乙腈一0．4 磷酸溶液 (10：90)和甲醇一水一0．295／ 方法 ，并从标准曲线 、精密度 、稳定性、重复性 、回收 磷酸 (5O：50：0．2)；绿原酸检测波长为327nm；黄 率等方面对该方法进行了方法学考证 。通过对试验 芩苷检测波长为 274rim；流速 ：1．00mL／min，柱 数据科学的分析观察，该法具有测定方法简便、数据 温 ：3O℃。在此条件下，理论塔板数按绿原酸峰计为 准确性好和重现性好的特点，可 以实现对银黄颗粒 8000，按黄芩苷峰计为 6000。绿原酸和黄芩苷色 质量的有效控制 。 谱峰与其他杂质峰分离度大于 1．5。结果显示 ，在 上述波