HPLC法测定奶粉中痕量炔雌醇.pdfVIP

第41卷 第6期 江汉 大学学报 (自然科学 版) Vol_41NO．6 2013年 l2月 J．JianghanUniv．(Nat．Sci．Ed．) Dec．2013 HPLC法测定奶粉中痕量炔雌醇 谭 芳 ，黄 璐 ，郑 琦，陈 燃 (江汉大学 化学与环境丁程学院，湖北 武汉 430056j 摘 要 ：建立了高效液相色谱 (HPLC)法测定奶粉中炔雌醇残留量的方法。样品以乙腈振 荡萃取、离 心，提取液浓缩后经O．45 m滤膜过滤，冷冻去脂，进高效液相色谱仪分析。研 究了萃取溶剂、萃取及浓缩 方式对萃取效率的影响，确立了色谱检测条件。乙腈一水(50：50)为流动相 ，流速 1mL／min，柱温30℃，检 测波长224nm。方法的检 出限为 16p．g／kg，加标回收率在86．5％～97．0％之 间，工作 曲线的相关系数为 0．9990，相对标准偏差为0．95％～2．叭％ (n=3)。方法快速、灵敏度高、分离效果好 ，样品处理 简单、无杂 质干扰 ，能够满足奶粉中雌激素分析的需要。 关键词：HPLC；奶粉检测；炔雌醇；食品安全 中图分类号：0657．72 文献标志码 ：A 文章编号：1673．0143(2013)06．0031．03 牛奶 中所含雌激素过高将导致儿童性早熟， 乙腈为色谱纯；无水乙醇为分析纯 ；实验用水为 也致使成年人发生乳腺或者妇科肿瘤 以及前列腺 双蒸水。 癌n 。因此 ，快速准确地检测牛奶制品中的雌激 精密称取炔雌醇对照品25mg，置 100mL容 素对于保障食品安全十分必要 。目前，国家出台 量瓶中，加无水 乙醇振摇使其溶解 ，并稀释至刻 的标准中 ，仅对牛奶中的雌激素建立了检测方 度 ，摇匀，作为贮备液 ，存放于冰箱备用 。样品 法 ，而奶粉的检测方法 尚无现行的国家标准。由 为市场购得 的孕妇奶粉 、婴幼儿配方奶粉 、中老 于奶粉配方基质复杂 ，激素残 留量低 ，建立快 年营养奶粉。 速、准确的方法来解决奶粉中的雌激素检测问题 1．2 样品处理 很有必要 。笔者对奶粉中的炔雌醇进行提取 、净 称取 2．0g奶粉试样于 50mL离心管 中，加 化处理 ，建立 了高效液相色谱法分析奶粉中炔雌 25mL乙腈混匀 ，置于空气浴振荡器振荡萃取 醇的方法 20min，4000r／min离心 10min，吸取上层清液 ， 用过滤膜过滤 ，收集滤液置于一24℃下冷冻4h， 1 实验部分 用过滤膜操作去除脂肪。精密量取萃取液10mL， 1．1仪器与试剂 30c=《下旋转蒸干 ，加无水 乙醇定容至0．2mL，进 1．1．1 仪 器 DIONEX高效液相色谱仪 (配有 入液相色谱仪分析检测 。 GP50型梯度泵 ，TCC一100柱温箱 ，UVD170U型 1．3 色谱条件 紫外检测器)，美 国戴安公司；色谱柱 ：Thermo 流速 1mL／min；柱温30℃；流动相 ：乙腈一水 C18柱 (250mm×0．46mlTl，5 m)，美 国热 电公 (50：50)为流动相 ；检测波长 224nm；进样量 司；HZQ—C空气浴振荡器，金坛市天竞实验仪器 20 L。在选定色谱条件下，对照品色谱图见图1。 厂 ；旋转蒸发仪 RE一52AA，上海亚荣生化仪器 2 结果与讨论 厂；800型低速离心沉淀机 ，中国深圳