HPLC法同时测定霉酚酸及其代谢产物的方法学研究.pdf

安 徽 医 药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2013Dec；17(12) ·2033 · ◇药物分析◇ HPLC法同时测定霉酚酸及其代谢产物的方法学研究 韩四忠 (安徽省望江县人 民医院，安徽 望江 246200) 摘要：目的 建立测定器官移植患者血浆中霉酚酸(Mycophenolicacid，MPA)与其代谢物 (霉酚酸葡萄糖苷，MPAG和霉酚酸酰 基葡萄糖苷，AcMPAG)的一种新颖简单的高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography，HPLC)方法。方法 以10％的 偏磷酸为沉淀剂采用蛋白沉淀的方法提取血浆中的待测物，MPA的类似物 (thecarboxybutoxyetherofMPA，MPAC)被用作内标 物质。色谱分析条件是以乙腈和磷酸缓冲液(pH2．7)作为流动相的梯度洗脱，流速 1．2mL ·rain～，紫外检测波长为254am。 结果 所有待测物基线分离好，在待测范围内与峰面积线性关系良好 (rt0．999)，方法精密(日间和日内变异度均≤6．02％) 且准确 (日间和日内准确度均在92．17％ ～104．78％之间)。MPA、MPAG和 AcMPAG在血浆中的回收率分别超过83．11％、 98．62％和93．94％，最低检测限则分别为0．1、0．2、0．1mg·L～。三种物质的在酸化过的血浆中，室温放置6h、4℃条件下放 置 12h、一40~C条件下放置4周及反复冻融三次均稳定无明显降解。提取后的三种物质在进样盘中放置至 12h同样稳定无降 解。结论 该方法简便 、灵敏且准确，可应用于MPA与其代谢物的临床监测。 关键词：霉酚酸；霉酚酸葡萄糖苷；霉酚酸酰基葡萄糖苷；高效液相色谱法 Simultaneousdeterminati0n0fmycophenolicacidand itsmetabolites in plasmabyhigh performanceliquid chromatography HAN Si--zhong (ThePeople’sHospitalofWangfiang，Anhui 246200，China) Abstract：Objective Todevelopanew，simple，sensitiveandspecificreversed—phasehighperfomranceliquidchromatographic (HPLC)methodbyusingultravioletdetectionfortheanalysisofMPAanditsmajormetabolites，mycopheuolicacidglucuronide (MPAG)andacylglucuronide(AcMPAG)inplasmaoforgantransplantrecipients．Methods The10％ coldmetaphosphoricacidwas chosenastheprotein．precipitatingreagentofrsimultaneousextractionoftheanallytes．ThecarboxybutoxyetherofMPA (MPAC)was usedasinternalstandard．Thechromatographicseparationwasachievedbygradientelutionconsistingofacetonitrileandphosphatebuffer fpH2．7adjustedwith85％ ．phosphoricacid)ataflowrateof1．2mL ·min～．TheUVdetectionwassetat254nm．Results The methodwasfoundtobeselective．1inear(r2I0．999)，precise(boththeintra．andinter．dayvariabilitywere≤6．02％)，accurate(both theintra．andinter．dayaccur