IL-18基因启动子区-656G_T基因多态性与类风湿关节炎和哮喘的关系.pdf

· 3290 · 广东医学 2013年11月 第34卷第21期 GuangdongMedicalJournalNov．2013，Vo1．34，No．21 IL一18基因启动子区一656G／T基 因多态性与 类风湿关节炎和哮喘的关系术 陈小文 ，易金萍 ，刘志强 ，朱清仙 南昌大学第一附属医院检验科(南昌330006)；江西省儿童医院检验科(南昌330006)；南昌大学医学院组织 与胚胎学教研室(南昌330006) 【摘要】 目的 探讨IL一18基因启动子区一656G／T基因多态性与类风湿关节炎和哮喘的关系。方法 采 用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR—SSP)对 120例哮喘(A组)、144例类风湿关节炎患者(R组)及 l12例健 康对照者 (C组)IL一18基因启动子区一656G／T基因型多态性进行检测。结果 一656T等位基因频率在 A、R、c 组中分别为50．O％、60．4％、48．7％，R组和c组之间差异有统计学意义(P0．05)。结论 IL一18基因启动子区 一 656G／T基因多态性与类风湿关节炎具有相关性而与哮喘无关。 【关键词】 白细胞介素一18；一656G／T；类风湿关节炎；哮喘 IL一18属 IL一1家族成员，是一个具有多效性的 1．2．2 引物设计与合成 采用序列特异性引物聚合酶 细胞因子。IL一18与 IL一12协 同作用诱导Thl型细 链反应 (PCR—SSP)原理…设计一对序列特异性引物 1 胞因子的产生，如 IFN— 、TNF— 。然而，IL一18也 和2，序列特异性引物 1为GcccTc1丫rACcTGAArIT丌一 能单独直接激活肥大细胞、嗜碱性粒细胞释放组胺 ；与 GGTAG；弓I物 2为 GCCCTCTFACCTGAA—TIITGGTAT。 IL一2协同作用能激活 NK细胞和T细胞产生 IL一4 下游引物为 TAAccTcArrrcAGGAcrrc。序列特异性 和 IL—l3，诱导 B细胞产生 IgE。因此 IL一18在 自身 引物 1和2分别与下游引物扩增G和T序列。 免疫性疾病和过敏性疾病炎症反应中都起着重要作 1．2．3 PCR扩增反应 一656G／T位点的PCR反应 用。据报道 IL一18基 因启动子 区单核苷酸多态性 循环参数为：94℃预变性2rain；94~C变性20S，61℃退 (SNP)可影响IL一18的产生，参与 自身免疫性疾病和 火40S，72~C延伸40S，30个循环。每份样品的PCR扩 过敏性疾病的发病机制。类风湿关节炎和哮喘分别作 增产物 (两管)，分别加入到含有溴乙锭的2％琼脂糖 为 自身免疫性疾病和过敏性疾病中常见的疾病与 IL一 凝胶中，1×TAE缓冲液，80V恒压电泳30rain，紫外灯 18基因SNP的关系有较多的报道，但有关IL一18基因 下观察结果。 启动子区一656G／T基 因多态性与类风湿关节炎和哮 1．3 统计学方法 采用 SPSS13．0软件基因型和等 喘的关系鲜见报道 。因此本文就对此作一报道 。 位基因频率分布符合Hardy—Weinberg平衡定律后 ，各 1 资料与方法 基因型及等位基因频率比较采用 x检验，计量资料用 1．1 一般资料 收集2011年6月至2012年5月南昌 t检验。 大学第一附属医院住院和门诊支气管哮喘患者 120例 2 结果 (A组)，其中男40例，女 80例，年龄 (34．5±9．5)岁 ， 2．1 PCR—SSP及测序结果 一656G／T位点的特异 均符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组2003年制 性正向引物反向引物扩增产物为246bp(图1)。各种 定的支气管哮喘防治指南诊断标准。类风湿关节炎患 基因型的扩增产物进行测序分别测 出野生型和突变 者144例(R组)，其中男 30例，女 114例，年龄(36．5± 型 ，与PCR—SSP方法结果一致 (图2)。 8．2)岁，均符合美 国风湿病协会 (ACR)1987年修订的