mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证.pdf

南方农业学报 JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE 2013，44(11)：1781—1784 ISSN 2095—1191；CODEN NNXAAB http：／／www．nfnyxb．an DOI：10．39690：issn．2095—1191．2013．11．1781 mCTAB—dLiC1法高效提取花生各 组织部位RNA及其验证 熊发前 ，，刘俊仙 ，王丛丛 ，贺梁琼 ，韩柱强 ，蒋 菁 ，钟瑞春 ， 李 忠·，唐秀梅 ，唐荣华1．“ (广西农业科学院 经济作物研究所，南宁 530007； 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁 530007； 广西农业 科学院 甘蔗研究所，南宁 530007； 仲恺农业工程学院，广州 510225) 摘要：【目的】探讨花生不同组织部位RNA提取方法，为开展花生分子生物学研究奠定基础。【方法 】在CTAB法的 基础上，设计一种改良的mCTAB．dLiC1法 ，其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖 ，使用两次10．0molL／的 LiC1沉淀RNA，采用琼脂糖凝胶 电泳检测RNA质量 ，核酸蛋白分析仪测定RNA纯度 ，并通过逆转录 、RT．PCR和 cDNA—SCoT验证其质量。【结果 】采用mCTAB．dLiC1法的RNA产率为554．80 g／g，RNA的A2A80比率为1．89，RNA非 变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带 ；扩增的28S和18s条带比值为2：1，且条带清晰无拖尾现象 ；提取的RNA 通过逆转录、RT．PCR扩增和cDNA—SCoT扩增验证 ，均获得较好的扩增效果 ，获得的RNA和cDNA质量好。 【结论 】 mCTAB—dLiC1RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法，可在花生分子生物学研究中应用。 关键词：花生；RNA提取；mCTAB—dLiC1法；组织部位 中图分类号：$565．2 文献标志码：A 文章编号：2095—1191(2013)11—1781—04 mCTAB-dLiCImethodforefficientlyextractingRNA from varioustissuesofcultivatedpeanutsand itsvertification XIONGFa-qian，，LIUJun-xian ，WANGCong-cong，HELiang-qiong， HANZhu—qiang，JIANGJing，ZHONGRui—chun，LIZhong， TANGXiu—mei．TANGRong—hua (CashCropsResearchInstitute，GuangxiAcademyofAgriculturalSciences，Nanning530007，China；GuangxiCrop GeneticImprovementandBioteehnologyLaboratory，GuangxiAcademyofAgriculturalSciences，Nanning 530007，China； , ’GuangxiSugarcaneResearchInstitute GuangxiAcademyofAgriculturalSciences，Nanning530007，China；Zhongkai ， UniversityofAgricultureand