MiR-738通过Wnt信号通路调控斑马鱼心脏发育.pdf

南 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) · 8 · JoumalofNantongUniversity(MedicalSciences)2014：34(1 MiR一738通过Wnt信号通路调控斑马鱼心脏发育 施林生 ，黄建飞，卢辉和 ，陈小丽，郑扣龙 ，林 刚 (江苏省南通市第一人 民医院心 内科 ，南通 226001) 摘【 要】 目的：研究miR一738对模式动物斑马鱼心脏发育的影响。方法 ：通过全胚胎原位杂交检测 miR一738的表 达。在斑马鱼受精卵中显微注射miR一738前体来过表达miR一738。通过显微镜成像来检测心脏表型。通过荧光素酶报 告基 因检测来验证 miR一738调控 Lefl。结果：MiR一738在 30hpf斑马鱼心脏表达。MiR一738过表达导致斑马鱼胚胎心 脏显著增大。MiR一738可以抑制 Lefl的表达 。结论 ：MiR一738通过 Wnt信号通路调控斑马鱼心脏发育。 f关键词】miR一738；心脏 ；Wnt；斑马鱼 ；发育 【中图分类号] R394．1 文【献标志码】A 文【章编号] 1674—7887(2014)01—0008—03 M iR一738regulatesthezebrafishheartformationthroughW ntsignaling SHILinsheng，HUANGJianfei，LUHuihe，CHENXiaoli，ZHENGKoulong，LINGang (DepartmentofCardiology， FirstPeople’SHospitalofNantong，Nantong226001) [Abstract】 Objective：ToexaminethefunctionofmiR-738involvedinzebrafishheatdevelopment．Methods：Bymicroinjec— tionofmiR一738precursorintozebrafishfertilizedeggtooverexpressmiR一738．Bymicroscopeimagingtochecktheheartphe— notype．ByusinglueiferasereporterassaytovalidatethatmiR-738regulatesLefldirectly．Results：MiR一738wasdetectedin zebrafishheartat30hpf．OverexpressionofmiR一738resultedintheenlargementofzebrafishembryonicheart．MiR一738in— hibitstheLeflexpression．Conclusion：MiR-738regulatesthezebrafishheartformationthroughWntsignaling． [Keywords] miR一738；heart；Wnt；zebrafish；development 心血管系统是脊椎动物胚胎发育过程中最早 良好的模式生物，其体型较小，可以通过渗透作用提 形成的并且达到功能状态的系统 1【]。心血管系统不 供氧气和营养，即使心血管有严重的畸形也可以存 仅为其他器官提供氧、营养物质和运输代谢废物， 活较长的时间。此外，斑马鱼胚胎发育期通体透明便 还传递指导其他器官发生、发育的信号分子。研究_21 于观测，且心脏发育在进化上与哺乳动物具有高度 证实脊椎动物的心脏形成受到分子水平的严格调 的保守性，因此被认为是研究心血管早期发育的良 控。MicroRNA(miRNA)是一类 内源性的单链、非编码 好的模式生物。本研究发现miR一738在斑马鱼早期 小RNA，长度 1925个核苷酸3_『。在动物细胞内，它 心脏中有表达 ，并且能够抑制 Wnt信号通路中的 们通过与一个或多个靶信使RNA的3’UTR碱基互 Lef1表达来调控心脏的发育。 补配对，形成RNA