OsLEA2基因在原核生物中的异源表达和抗性分析.pdf

2013年 26卷6期 西 南 农 业 学 报 V01．26 No．6 SouthwestChinaJournalofA culturalSciences 文章编号：1001—4829(2013)o6—2281—04 OsLEA2基 因在原核生物 中的异源表达和抗性分析 胡廷章，钟 彦，陈 林，杨俊年，黄小云 (重庆三峡学院生命科学与工程学院，重庆 404000) 摘 要：为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能，利用PCR方法扩增 目的基因，采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性 分析对 OsLEA2基因进行研究。结果表明，构建的原核表达载体pET32a—OsLEA2。转化到E．coliBI221中，得到表达OsLEA2融合蛋 白的工程菌；SDA—PAGE分析表明融合蛋白的分子量约为29．4kDa。OsLEA2的表达增强了大肠杆菌对高盐、高温、低温和紫外照 射等非生物胁迫的抗性。该研究为进一步改 良作物品种、提高农作物的抗逆性奠定基础。 关键词：胚胎发育后期丰富蛋白；OsLEA2；异源表达；大肠杆菌；抗逆性 中图分类号：Q796 文献标识码 ：A AnalysisonHeterologousExpression ofOsLEA2 GeneinProkaryotesandItsResistance HUTing-zhang，ZHONGYan，CHENLin，YANGJun-nian，HUANGXiao·)run (SchoolofLifeScienceandEngineering，ChongqingThreeGorgesUniversity，Chongqing4O4OOO，China) Abstract：InordertoinvestigatethefunctionoflateembryogenesisabundantproteingeneOsLEA2，thetargetgenewagamplifiedbyPCR， anditsOsLEA2genewasstudide withgenerecombinationtechnique，proteinexpressionandanalysisofstresstolerance．Theresultshowde thattherecombinantplasmidpEI30a-OsLEA2WaSconstructedandtransformde intoE coliBL21，andhtegeneticengineeringbacteriathat expressedOsLEA2fusionproteinwere obtainde．SDAanalysisindicatde thatthemolceularmm ofOsLEA2fusionproteinwag29．4 kDa．Th eresultsofstresstoleranceassaydemonstratedthatrceombinantE coilceHsproducingOsLEA2ufsionproteinexhibitedimprovde resistanceagainstdiverseabioticstresses：highsalinity，heat，freeze—htawandultravioletradiation．Thisresearchwouldprovideasolidbasis forthedevelopmentofcropswithenhancde resistancetodiversestresses． Keywords：Lateembryogenesisabundantprotein；OsLEA2；Heterologousexpression；Escherichiacoli；Resistance 植物在生长、发育、生殖过程中，赖 以生存的环 在研究植物抗逆机制的过程中，胚胎发育后期 境并不总是适宜的，干旱、高温、低温、土壤盐碱化和 丰富蛋 白 (1a