三聚氰胺检测试剂盒-深圳同诺生物技术有限公司.docVIP

三聚氰胺检测试剂盒 使用说明书 【原理及用途】 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测奶粉、牛奶、组织、饲料、蛋类、血清等样本中的三聚氰胺（Melamine，Mel），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的三聚氰胺和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗三聚氰胺抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含三聚氰胺含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中三聚氰胺的残留量。 【技术指标】 1、试剂盒灵敏度：1ppb(ng/ml) 2、反应模式：25℃，30min～15min。 3、检测下限： 奶粉：20ppb 牛奶：16ppb 牛奶/奶粉（处理法二）：1ppb 组织（鸡/猪/鸭/鱼/虾/肝脏）：2ppb 饲料：100ppb 蛋类：20ppb 血清：4ppb 4、交叉反应率： 三聚氰胺：100% 三聚氰酸：60% 三嗪：＜1% 三嗪二铵：＜1% 5、样本回收率： 牛奶、奶粉：90%±20% 组织：85%±20% 饲料：85%±20% 蛋类：80%±20% 【试剂盒组成】 酶标板：96孔×1块 标准液（绿盖）：各1ml×1瓶（ 0ppb，1ppb，3ppb，9 ppb，27ppb，81ppb） 高标准液（红盖）：1ppm，1ml×1瓶 酶标记物 (红盖)：5.5ml×1瓶 抗体工作液 (蓝盖)：5.5ml×1瓶 底物液A (白盖)：6ml×1瓶 底物液B(黑盖)：6ml×1瓶 终止液(黄盖)：6ml×1瓶 20×浓缩洗涤液(透明盖)：40ml×1瓶 2×复溶液(黄盖)：50ml×1瓶 说明书：1份 【器材和试剂】 1、仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）； 2、微量移液器：单道20μl～200μl，100μl～1000μl、多道300μl； 3、试剂：乙腈、氢氧化钠、浓盐酸、正己烷、甲醇 【样本前处理】 1、样本处理前须知： 实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。实验之前须检查各种实验器具是否干净，必须使用洁净实验器具，以避免污染干扰实验结果。 溶液配制 1M盐酸溶液配制：量取8.6ml浓HCl加去离子水至100ml； 乙腈-0.1M氢氧化钠溶液配制：量取84ml乙腈和16ml 0.1M氢氧化钠溶液混合均匀； 0.1M氢氧化钠溶液配制：称取0.4g氢氧化钠加去离子水至100ml； 1M 氢氧化钠溶液配制：称取4g NaOH加去离子水至100ml； 复溶液配制：用去离子水将2×复溶液按1:1 体积比进行稀释，用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。 3、样本前处理 3.1 牛奶专用样本处理方法： 取牛奶样本600μl到2ml的离心管中，加入1ml乙腈，充分振荡混匀；4000r/min离心5min； 取100μl上清液，加入900μl样本复溶液，混匀； 取50 μl用于分析。 牛奶样本稀释倍数：16；检测下限：16ppb 3.2 奶粉专用样本处理方法： 称取2.0±0.05g奶粉样本至50ml离心管中，加入4ml甲醇，充分振荡； 15℃4000r/min离心10min，取100μl上清液，再加入900μl样本复溶液，混匀； 取50μl用于分析。 奶粉样本稀释倍数：20；检测下限：20ppb 3.3 饲料样本处理方法： 将饲料样品研碎，称2.0±0.05g研碎的饲料样品，加入2ml 1M盐酸溶液，加入16ml去离子水均质； 旋流1min，放振荡器上振荡2min； 15℃ 4000r/min离心15min，取出10ml上清液并用1M氢氧化钠溶液将pH值调至6～8（注：因饲料样品的不同，加入1M氢氧化钠溶液的量有所差异，根据情况调节，一般加入范围是0.5～1ml之间）。 15℃ 4000r/min 离心15min，吸出上清液（如果上清仍然浑浊可提高转速或用滤纸过滤）； 用样本复溶液10倍稀释上清液（取100μl上清液加入900μl样本复溶液，并且混合均匀，混合30s）； 取50μl进行分析。 样本稀释倍数：100；检测下限：100ppb 3.4 牛奶/奶粉样本处理方法二： 取2ml奶样或2g奶粉至离心管中； 加入8ml乙腈-0.1M NaOH充分振荡2min，15℃ 4000r/min离心10min，取4ml上清液在56℃条件下氮气或空气流吹至完全干燥； 用1ml正己烷溶解干燥的残留物后，再加入1ml样本复溶液混合30s，离心去除上层正己烷相； 取50μl用于分析。 样本稀释倍数：1；检测下限：1ppb 3.5 组织（鸡/猪/鸭/鱼/虾/肝脏）样本处理方法： 取2.0±0.05g均匀组织样本于50ml离心管中； 加入8ml乙腈-0.1M NaOH充分振荡2min，1