植物细胞有丝分裂制片和观察.ppt

植物细胞有丝分裂的制片与观察 一、实验目的 1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术 2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形 态特征 二、实验原理 1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝 分裂 2.在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动 态变化 3.染色体可被碱性染料着色，便于观察 4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别 有丝分裂不同时期 三、实验仪器和药品 1.仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、 烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、 镊子、滴管、刀片、玻璃皿 2.材料：大蒜 3.药品：诺卡氏固定液 1mol/L的HCl作为解 离液、卡宝品红作为染色液 七、作业 1、实验过程中需要注意哪些事项？ 2、将实验结果以图片的形式呈现在实验报 告中，若实验失败，请分析失败原因。 3、根据实验结果，请总结植物有丝分裂各 个时期的特点。 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定： 实验前3-4d，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺 有四层纱布的托盘里放入温度为25℃， 一定湿度的培养箱中培养，每天换 水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸 水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液 （乙醇:冰醋酸=3:1）固定4~24小时。 固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态， 维持染色体的完整性，提 高染色效果 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 （1）解离 目 的： 使组织中的细胞分离开 操作： 先用95%的酒精漂洗，在HCL中 60℃水浴5min左右 （c）解离时，细胞已死亡 （a）解离充分是实验成功的必备条件 注意： （b）解离过度，细胞结构被破坏 解离液： 1mol/L的HCl 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 漂洗液： 清水（先置于清水中浸泡2min左右） 目的： 洗去解离液，便于染色 次数： 2-3次 注意： 若不漂洗 解离过度（HCl作用） 影响染色（HCl与碱性染料反应） （1）解离 （2）漂洗 备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 （1）解离 （2）漂洗 （3）取材 部位： 根尖2-3mm 注意： 要去除根尖乳白色根冠 （根尖分生区） 成熟区 伸长区 分生区 根冠 根尖的结构 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 （1）解离 （3）取材 （2）漂洗 （4）染色 操作： 用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均 匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8分钟后， 盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻 压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。 目的： 使细胞分散开，有利于观察 注意： 染色时敲片的力度要适中 染色剂： 卡宝品红染液 时间： 6-8min （使染色体（质）着色） 染色时间过长—细胞全被染色， 无法观察 染色时间过短—染色体颜色过浅， 影响观察 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 解离→漂洗→取材→染色 3.观察 （1）低倍镜观察： 找到分生区细胞 特点： 细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞 （2）高倍镜观察： 在低倍镜的基础上换用高倍镜 （3）仔细观察： 先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点 （4）移动观察： 慢慢移动装片，完整观察各个时期 四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作 解离→漂洗→取材→染色 3.观察 低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察 注意： a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在 一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。 b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细胞分裂的动态变化。 c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多 操作要点 1.解离：培养好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol /L的HCl中60℃水浴5min左右 2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3 次，最后置于盛有清水的培养皿中 3.取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白 色的根冠 4.染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖 均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8min后， 盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载 玻片随即用一次性筷子进行敲片。 5.观察：首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。 五、实验结果对比图 间期 前