动物检验检疫技术.ppt

第四章 动物检验检疫技术 Contents 第一节 检验检疫样品 一、病料采集和运送 (一)病料采集基本原则 （1）在采取病料前必须对被检动物可能患有何种疫病作出初步诊断。 （2）采取病料所用容器、手术器械都应事先消毒，确保无毒，采样时应无菌操作。 （3）应做好人身防护，严防人畜共患病感染。 （4）应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害肉尸的处理。 （5）如果动物已死亡，有特殊要求 如果动物已死亡，取样应注意 急性死亡动物, 如怀疑是炭疽，不可随意解剖，应从耳尖或四肢末梢血管取血制成涂片,染色镜检, 万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。排除炭疽后方能剖检取样 采取病料时间,原则是越早越好, 内脏病料的采取，如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h。夏季要在动物死亡后2小时内采取病料； 采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。在无法估计病因时，可进行全面的采集。 填写好病料送检单和剖检病理变化记录。 （二）使用器械的消毒 刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min。 器皿(玻制等)经高压灭菌或干烤灭菌；或放于0.5%～1%的碳酸氢钠水中煮沸10min～15min； 软木塞和橡皮塞置于0.5%石碳酸水溶液中煮沸10分钟 载玻片在1%～2%的碳酸氢钠水中煮沸10min～15min；水洗后用清洁纱布擦干，保存于酒精、乙醚等溶液中备用 一般使用一次性针头和注射器。采取一种病料，使用一套器械与容器； 5、采过病料的用具应先消毒后清洗。 （三）病料的采取方法 1、血液 （1）采血部位 大的哺乳动物可选用颈静脉或尾静脉采血，也可采胫外静脉和乳房静脉血。 毛皮动物小量采血可穿刺耳尖或耳壳外侧静脉，多量采血可在隐静脉采集，也可用尖刀划破趾垫0.5cm深或剪断尾尖部采血。 啮齿类动物可从尾尖采血，也可由眼窝内的血管丛采血； 兔可从耳背静脉、颈静脉或心脏采血。 禽类通常选择翅静脉采血，也可通过心脏采血。 小鼠 猪前腔静脉采血 （2）采血方法 对动物采血部位的皮肤先剃毛(拔毛)，75%的酒精消毒，待干燥后采血； 采血可用针管、针头、真空管或用三棱针穿刺，将血液滴到开口的试管内。 禽类等的少量血清样品的采集，可用塑料管采集。用针头刺破消毒过的翅静脉，将血液滴到直径为3mm～4mm的塑料管内，将一端封口。 （3）血样种类 ①全血样品 进行血液学分析，细菌、病毒或原虫培养，通常用全血样品，样品中加抗凝剂。 抗凝剂可用0.1%肝素、阿氏液或4.0~5%枸橼酸钠液。 采血时应直接将血液滴入抗凝剂中，并立即连续摇动，充分混合。也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱纤维蛋白。 ②血清样品 进行血清学试验。血液中不加抗凝剂，血液在室温下静置2h～4h，待血液凝固，有血清析出时，用无菌剥离针剥离血凝块，然后置4℃冰箱过夜，待大部分血清析出后取出血清，必要时经低速离心分离出血清。 在不影响检验要求原则下可因需要加入适宜的防腐剂。 做病毒中和试验的血清避免使用化学防腐剂(如硼酸、硫柳汞等)。若需长时间保存，则将血清置20℃以下保存，但要尽量防止或减少反复冻融。 样品容器上贴详细标签。 ③血浆的采集 采血试管内先加上抗凝剂，血液采完后，将试管颠倒几次，使血液与抗凝剂充分混合，然后静止，待细胞下沉后，上层即为血浆。 2、一般组织（包括内脏组织） （1）采样方法 用常规解剖器械剥离死亡动物的皮肤，体腔用消毒的器械剥开，所需病料按无菌操作方法从新鲜尸体中采集。剖开腹腔后，注意不要损坏肠道。 （2）采样种类 ①病原分离样品的采集 用于细菌分离的样品的采集，首先以烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于适宜培养基上 ②组织病理学检查样品的采集 采集包括病灶及临近正常组织的组织块，立即放入10倍于组织块的10%福尔马林溶液中固定。组织块厚度不超过0.5cm，切成1cm2～2cm2 。组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在0℃～4℃容器中，尽快送实验室检验。 3、液体病料 采集胆汁、脓、粘液或关节液等样品时，用烫烙法消毒采样部位，用灭菌吸管、毛细吸管或注射器经烫烙部位插入，吸取内部液体材料，然后将材料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。也可用接种环经消毒的部位插入，提取病料直接接种在培养基上。 供显微镜检查的脓、血液及粘液抹片的制备方法:先将材料置玻片上，再用一灭菌玻棒均匀涂抹或另用一玻片推抹。组织块、致密结节及脓汁等亦可在两张玻片中间，然后沿水平面向两端推移。用组织块作触片时，持小镊将组织块的游离面在玻片上轻轻涂抹即可。 4、皮肤 病