产角蛋白酶菌株BacillussubtilisA1_2液体发酵产酶条件的优化.pdfVIP

营 养 研 究 2015年第36卷第15期 总第492期 产角蛋白酶菌株BacillussubtilisA1-2 液体发酵产酶条件的优化 ■ 闫志宇 李术娜 李红亚 徐丽娜 朱宝成1 1 1 2 1 （1.河北农业大学生命科学学院，河北保定071001；2.河北工程大学科技处，河北邯郸056038） 摘 要：文章旨在对角蛋白酶产生菌BacillussubtilisA1-2菌株的发酵产酶条件进行优化。以发 酵液上清中的角蛋白酶活力为检测指标，利用单因素试验和正交试验相结合的方法优化该菌株摇瓶 发酵产角蛋白酶的最适诱导物、碳氮源、无机离子、表面活性剂及最佳培养基配方与发酵参数。获得 BacillussubtilisA1-2菌株的液体深层发酵产角蛋白酶条件如下：培养基配方为玉米粉3.0%，黄豆饼 粉3.0%，80 目羽毛粉3.0%，CaCl2 0.5%，表面活性剂吐温-80 0.5%；最优发酵参数为：培养基起始 pH值8.0，250 ml三角瓶中装液量30 ml，发酵温度37 ℃，接种量6.0%，发酵60 h；此条件下该菌株角 蛋白酶活力达642.1U/ml，相比优化前的初始酶活力328.5 U/ml提高了95.46%。本研究结果为该菌 用于角蛋白资源的开发利用奠定了基础。 关键词：动物蛋白饲料；角蛋白；角蛋白酶；酶活力；培养基；发酵参数；优化 doi:10.13302/ki.fi.2015.15.005 中图分类号：S816.32 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2015）15-0018-06 Liquidfermentationenzymeproducingconditionsoptimizationofkeratinaseproductionstrain bacillussubtilisA1-2 YanZhiyu,LiShuna,LiHongya,XuLina,ZhuBaocheng Abstract：In this study, liquid fermentation enzyme producing conditions of keratinase production strainBacillussubtilisA1-2 wereoptimized.Keratinaseactivitywaschoosedasdetectionindex,by singlefactorandorthogonalexperiments,factorsaffectingtheenzymeproductionofthestrainA1-2 suchasinducer,carbonnitrogensources,inorganicion,surfaceactiveagents,andmediumformula, fermentationparameterswereinvestigated.Theoptimumconditionsforshakeflaskfermentationareas follows:cornmeal 3.0%,soybeanmeal 3.0%,feathermeal 3.0%,Ca2+0.5%,surfactantsTween-80 0.5%;MediuminitialpH 8.0,shakeflaskliquidvolumewas 250 mlflaskfilledwith 30 mlfermenta⁃ tionmedium,fermentationtemperature 37 ℃,inoculumsize 6.0%，fermentationtime 60 h.Underthe above mentioned conditions the produced keratinase activity of A1-2 strain cultured reached to 642.1 U/ml, increasedby 95.46%t