凡纳滨对虾肝胰脏原代细胞培养体系的优化.pdf

2015年第36卷第20期 总第497期 SILIAOGONGYE 凡纳滨对虾肝胰脏原代细胞培养体系的优化 1 2 2 1 1 1，2 1 ■郑玉忠 刘亚群 刘 昂 杨培奎 查广才 庄东红 张振霞 (1.韩山师范学院生物系，广东潮州521041；2.汕头大学广东省海洋生物技术重点实验室，广东汕头515063） 摘 要：试验目的是为研究优化凡纳滨对虾肝胰脏原代细胞的培养体系。试验基于MTT法，分 析不同培养条件（包括培养基类型、pH值、渗透压、FBS添加量等因素）对凡纳滨对虾肝胰脏原代细胞 培养体系的影响。结果表明：在pH值为7.6，NaCl添加量为1.2%，FBS添加量为5%的2×L-15培养基 中，凡纳滨对虾肝胰脏原代细胞生长状况最好。因此，通过改变培养条件，可以适当优化凡纳滨对虾 肝胰脏原代细胞的培养体系，但未能获得良好的传代细胞。 关键词：凡纳滨对虾；肝胰脏；原代细胞；培养基;pH值；渗透压；FBS doi:10.13302/ki.fi.2015.20.010 中图分类号：S816.32 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2015）20-0047-04 OptimizationofculturesystemaboutPenaeusvannameihepatopancreasprimarycell ZhengYuzhong,LiuYaqun,LiuAng,YangPeikui,ZhaGuangcai,ZhuangDonghong,ZhangZhenxia Abstract Theaimofthetrialwastooptimizetheculturesystemoftheprimarycellfrom Penaeusvan⁃ ： namei hepatopancreas. BasedontheMTTmethod,differentconditions(includingmediumtypes,pH, osmoticpressureandFBSamount)toculture Penaeusvannamei hepatopancreasprimarycellwerede⁃ termined. Theoptimumcultureconditionsofhepatopancreasprimarycellwasasfollows: 2×L-15medi⁃ umpH(7.6)supplementedwith 5%(v/v)FBS, 1.2%NaCl(w/v). Byalteringthecultureconditions,the primaryculturesystemof Litopenaeusvannamei hepatopancreaticcellshadbeenproperlyoptimized, butstablecelllinesfailedtobeobtained. Keywords Penaeusvannamei；hepatopancreas；primarycell；medium；pH；osmolality；FBS ： 凡纳滨对虾（Penaeusvannamei），亦称南美白对 生抗药性，甚至产生新型病害，进而导致对虾遭受更 虾，是国际公认高养殖、高产量的三大优良虾种（凡纳 严重的病害或种质衰退。同时，抗生素在对虾体内的 滨对虾、斑节对虾和中国对虾）之一。凡纳滨对虾抗 残留又会造成食品安全问题，影响人的健康。 病力强、耐盐性广、适应能力强、生长快、产肉率高，是 对虾原代细胞培养是研究对虾病害的致病机理、 世界水产市场的热销品种，1988年引入我国后迅速掀 诊断和防控技术的重要手段。肝胰脏恰恰是对虾最 起养殖热潮，目前的凡纳滨对虾产量占全国对虾产量 为关键和核心的器官，参与消化、吸收、储存、代谢等 的80%以上。 重要生理活动，特别在启动对虾免疫反应中起重要 随着凡纳滨对虾养殖规模的迅速扩张，高密度的 作用。如能建立肝胰脏细胞培养条件