HPV基因诊断试剂盒.ppt

亚能生物 人乳头瘤病毒（Human Papillomaviruses, HPV） 双链DNA无包膜病毒 环状DNA，约8Kb； 病毒颗粒直径为50～55nm； 依靠宿主细胞进行复制、转录和翻译。 HPV在欧洲的常见分型和感染率 最常见的低危型（HPV6、11） 最常见的高危型（HPV16、18、31、33、45、58 ） 浙江12000例HPV检测初步结果 分型情况：16型占26%左右，其他依次为58、33、52、45、18。与其他地区的统计有明显差异。 高危人群阳性率在30%左右，普通人群在11%左右。 温州地区丽水地区阳性率明显高于省内其他地区。 进一步的研究正在进行中。 HPV基因结构 按功能可分为早期区(E区)、晚期区(L区)和非编码区 （ LCR）三个区域。 E区分为E1～E7开放阅读框架，主要编码与病毒复制、转录、调控和细胞转化有关的蛋白（ HPV无E3）。 L区分L1和L2，分别编码主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白。 LCR是E区与L区间-6.4～1.0Kb的DNA片段，可负责转录和复制的调控 HPV的致癌机理 HPV以游离态感染上皮细胞后，可以持续存在于染色体外，不引起任何病变，或引起良性病变和低度病变，如尖锐湿疣或轻度不典型增生等。而癌变则与病毒DNA整合入宿主染色体密切相关。 高危型HPV DNA链通常在E1或E2的开放读码框内断裂，使HPV DNA整合入染色体脆弱区。E6和E7具有促进和维持整合状态的功能。 HPV E6蛋白间接抑制 p53活性，阻碍细胞对DNA损伤的反应。（负向调节细胞的生长和分化） HPV E7蛋白与pRb结合后使其功能失活，改变细胞周期的正常调控。 国内对不同亚型感染致病性研究近况 北京大学第一临床医院赵健等对1715例患者研究表明：在高危型中，致癌性最强的是16型，其次是33和31型。（十五攻关资助项目）。 在北京中日友好医院进行的591例研究中，发现多重感染患者发生宫颈癌的危险性明显高于单一感染者，对放疗敏感性差，无进展生存期和带瘤生存期比单一感染者明显缩短。 中国癌症研究基金会（CCRF）宫颈癌筛查及早诊早治指南 筛查方案：基本方案：肉眼观察＋冰醋酸试验（碘液试验）（农村普查） 一般方案：HPV+pap smear检测（二级及以上医院） 最佳方案：HPV+TCT检测（发达地区） 检查后随访对象：细胞学低度病变、CIN I以上者、“特殊职业”妇女人群、年龄 30 岁以上的高危HPV感染者，每年定期随访检查。 注意事项： 1、月经来潮后10～18天为最佳检查时间 2、检查前48h内不要做阴道冲洗，不用使用阴道内用药物 3、检查前48h内不要行性生活 宫颈癌的常规临床检测方法 临床检查：如肉眼观察、阴道镜等 操作简便，但准确率和特异性有待提高（50-70％） 细胞学检测：观察宫颈上皮细胞的变异，常见方法有：巴氏涂 片、LCT、 TCT等（70%以上） 1）长期宫颈糜烂可导致宫颈上皮细胞形态变异，但非HPV引起的细胞形态异常与宫颈癌病变没有直接联系。 2）在感染早期，细胞往往不会出现形态变化，但此时HPV对细胞内遗传物质的损伤可能已经产生。 病毒学检测：HPV DNA检测（PCR方法），常见方法有：基因芯 片分型检测、HC-2、荧光PCR等 特异性强、灵敏度高，操作简便快捷 (98%) HPV基因分型快速诊断试剂 应用膜杂交技术建立的敏感、特异、简便的检测方法，可同时对23种HPV亚型 (18种高危型及5种低危型)进行检测。 结果判断 GC-HPV与TCT的差异 子宫颈筛查经过的处理原则 慢性宫颈炎：物理治疗，激光、电烙、微波、冷冻 子宫颈CIN的处理 CINⅠ 物理治疗：激光，微波等 CINⅠ－Ⅱ Leep治疗， CINⅢ 一般情况下会诊断为CINⅢ，不再可能采用物理治疗手段 当排除了CIS，治疗可行Leep治疗 已确诊为CIS或更严重，目前不可能采用Leep治疗，而可能冷刀锥切 若已完成生育者，一经诊断为CIS，应接受全子宫切除手术 HPV检测后处理原则（综合） 对可疑病例进行HPV检查： 阴性：进行常规治疗(针对症状体症进行治疗)。 阳性：HPV结果阳性而未做细胞学检查必须进行TCT检查。 HPV检测后处理原则 HPV阳性而TCT阴性： 1、年龄30岁，可不进行处理并定期复查（6-12个月），有条件者或有宫颈糜烂者，可进行药物治疗，有利于